本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA技術(shù)原理，將大鼠VEGF-B特異性捕獲抗體固定于微孔板表面，加入標(biāo)準(zhǔn)品與待測(cè)大鼠樣本后，樣本中的VEGF-B抗原與固相抗體發(fā)生特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入酶標(biāo)記VEGF-B檢測(cè)抗體，形成穩(wěn)定的免疫復(fù)合物，隨后進(jìn)行底物顯色、終止反應(yīng)操作，通過酶標(biāo)儀讀取各孔吸光度，吸光度大小與樣本中VEGF-B濃度呈正相關(guān)，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可完成定量檢測(cè)。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒
英文名稱：VEGF-B ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1539
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)靈敏度≤3pg/mL，適配大鼠低濃度VEGF-B樣本精準(zhǔn)檢測(cè)
檢測(cè)范圍：6pg/mL - 900pg/mL，覆蓋大鼠心肌、血管組織VEGF-B表達(dá)區(qū)間
反應(yīng)時(shí)間：全流程反應(yīng)耗時(shí)95分鐘，分步溫育，抗原抗體結(jié)合充分
保存條件：試劑2-8℃冷藏避光保存，嚴(yán)禁冷凍，標(biāo)準(zhǔn)品需密封存放
有效期：未開封試劑盒有效期6個(gè)月
特異性：專一性識(shí)別大鼠VEGF-B，與VEGF-A、VEGF-C、VEGF-D無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)≤7%，板間變異系數(shù)≤8%
注意事項(xiàng)：組織樣本勻漿需充分離心，去除殘?jiān)?；不同批次試劑不可混用，保證實(shí)驗(yàn)一致性。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫放置 25min，截取對(duì)應(yīng)數(shù)量酶標(biāo)條，區(qū)分空白、標(biāo)準(zhǔn)、待測(cè)三組孔位。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成 5 個(gè)濃度梯度，標(biāo)準(zhǔn)孔加 55μL 標(biāo)品，樣本孔上樣 55μL 大鼠組織上清，空白孔補(bǔ)稀釋液。
每孔加入酶偶聯(lián)試劑 110μL，覆膜封閉微孔板，37℃孵育 56min。
洗板 5 次，每次浸泡 31s，甩干廢液后吸干板底水分。
顯色混合液 100μL 加入各孔，避光 37℃顯色 18min。
加入 55μL 終止液終止顯色，橫向搖晃酶標(biāo)板混勻。
酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù)，換算樣本 VEGF-B 含量。
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關(guān)鍵字： 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B;VEGF-B;ELISA試劑盒;
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