本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA檢測原理，微孔板固相包被大鼠ADAMTS13/vWF-cp特異性捕獲抗體，加入待測大鼠樣本與標(biāo)準(zhǔn)品后，樣本中的裂解蛋白酶抗原與固相抗體特異性結(jié)合，充分反應(yīng)后洗滌純化，加入酶標(biāo)記的特異性檢測抗體，構(gòu)建免疫夾心復(fù)合物，通過底物顯色、終止反應(yīng)后測定吸光度，吸光度數(shù)值與樣本中ADAMTS13含量成正比，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線完成定量檢測。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒

英文名稱：ADAMTS-13/vWF-cp ELISA
貨號(hào)：Y-E1073

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測靈敏度≤3pg/mL，精準(zhǔn)檢測大鼠ADAMTS13蛋白酶含量

檢測范圍：6pg/mL - 700pg/mL，適配大鼠血栓、凝血功能紊亂模型檢測

反應(yīng)時(shí)間：全流程實(shí)驗(yàn)耗時(shí)110分鐘，酶抗原結(jié)合充分，數(shù)據(jù)穩(wěn)定

保存條件：酶類試劑2-8℃避光冷藏，嚴(yán)格避免高溫、凍融失活

有效期：原裝未開封試劑盒有效期6個(gè)月

特異性：專一性靶向大鼠ADAMTS13，與其他金屬蛋白酶無交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)≤6%，板間變異系數(shù)≤8%

注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)全程使用無酶耗材，避免蛋白酶污染導(dǎo)致檢測偏差。
通用注意事項(xiàng)：

樣本要求

血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會(huì)導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動(dòng)、室溫過低會(huì)降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會(huì)造成高背景、假陽性；拍干時(shí)使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實(shí)驗(yàn)耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護(hù)

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實(shí)驗(yàn)廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時(shí)，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對(duì)照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實(shí)驗(yàn)作廢重做。

儲(chǔ)存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會(huì)造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

全套試劑室溫靜置 32min，拆分微孔板，設(shè)置對(duì)照孔與樣品檢測孔并標(biāo)記。

梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)孔加 50μL 標(biāo)品，血清樣本孔加入 50μL 待測大鼠血清，空白孔加稀釋緩沖液。

每孔添加酶工作液 100μL，密封封膜，37℃孵育 71min。

洗板 5 輪，浸泡 34s 每輪，瀝干微孔內(nèi)所有液體。

顯色 A、B 液各 50μL 依次加樣，避光顯色 15min。

50μL 終止液終止反應(yīng)，輕震酶標(biāo)板混勻體系。

450nm 波長檢測吸光值，定量 ADAMTS13/vWF-cp 含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：