本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理,微孔板包被大鼠VWF特異性捕獲抗體,加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)大鼠樣本后,樣本中的VWF抗原與固相抗體特異性免疫結(jié)合,洗板去除游離雜質(zhì),加入酶標(biāo)記VWF檢測(cè)抗體,形成穩(wěn)定的免疫夾心復(fù)合物,經(jīng)底物酶促顯色、終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度,OD值與樣本中VWF含量正相關(guān),結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)定量血管性血友病因子的含量。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒
英文名稱:vWF ELISA Kit
貨號(hào):Y-E1308
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢測(cè)靈敏度≤0.05IU/mL,精準(zhǔn)定量大鼠血漿VWF活性含量
檢測(cè)范圍:0.1IU/mL - 5IU/mL,適配大鼠凝血功能、血管損傷模型檢測(cè)
反應(yīng)時(shí)間:全流程實(shí)驗(yàn)耗時(shí)100分鐘,蛋白結(jié)合反應(yīng)充分,檢測(cè)精準(zhǔn)
保存條件:試劑盒2-8℃避光冷藏,嚴(yán)禁冷凍,防止蛋白變性
有效期:未開封試劑盒有效期6個(gè)月
特異性:特異性識(shí)別大鼠VWF,無(wú)血漿其他凝血因子交叉干擾
重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<8%
注意事項(xiàng):血漿樣本需無(wú)凝塊、無(wú)溶血,否則會(huì)直接影響VWF活性檢測(cè)結(jié)果。
關(guān)鍵注意事項(xiàng):

實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書,不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光,避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下:

試劑盒室溫平衡 30min,截取酶標(biāo)板條,對(duì)所有檢測(cè)孔進(jìn)行編號(hào)分類。
凍干標(biāo)準(zhǔn)品溶解稀釋為梯度濃度,標(biāo)準(zhǔn)孔加 55μL 標(biāo)品,大鼠抗凝血漿孔上樣 55μL 樣本,空白孔補(bǔ)稀釋液。
每孔加入酶結(jié)合液 110μL,覆膜封板,37℃恒溫孵育 62min。
洗板 4 次,洗滌液浸泡 26s / 次,倒置拍干微孔廢液。
100μL 顯色底物液加入微孔,避光 37℃顯色 20min。
55μL 終止液終止顯色反應(yīng),橫向晃動(dòng)酶標(biāo)板。
酶標(biāo)儀 450nm 讀取 OD 值,計(jì)算 VWF 樣本濃度。
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關(guān)鍵字: 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子;VWF;ELISA試劑盒;
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