本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，微孔板固定純化的大鼠LIF特異性捕獲抗體，加入梯度標準品及大鼠生物樣本后，樣本中的LIF抗原與固相抗體特異性免疫結(jié)合，洗滌干凈后加入酶標記的LIF檢測抗體，形成穩(wěn)定的三元夾心復合物，通過底物酶促顯色反應產(chǎn)生特異性顯色，終止反應后檢測吸光度，對照標準曲線精準測定大鼠樣本中LIF的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒
英文名稱：LIF ELISA Kit
貨號：Y-E1497
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測濃度≤1.2pg/mL
檢測范圍：3pg/mL - 800pg/mL
反應時間：全程3.6小時標準孵育流程
保存條件：2-8℃低溫保存，標準品-20℃分裝凍存
有效期：原裝6個月，分裝標準品1個月有效
顯色系統(tǒng)：高靈敏TMB顯色體系
檢測波長：450nm/620nm雙波長檢測
標準曲線繪制：8梯度濃度，曲線擬合R2≥0.995
特異性：特異性識別大鼠LIF，與細胞生長抑制因子無交叉反應
重復性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤9%
注意事項：樣本避免反復凍融；孵育過程保持恒溫恒濕；顯色時間精準把控
關鍵注意事項：
實驗前需仔細閱讀對應試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下：
室溫平衡試劑盒 28min，稀釋 LIF 標準品，分置酶標板三組微孔；
每孔加入 50μL 梯度標準品或大鼠血清樣本，空白孔填充稀釋緩沖液；
即刻加入 100μL 酶標抗 LIF 特異性抗體，覆膜封閉板面；
37℃避光孵育 64min，一步共孵育生成抗原抗體復合物；
洗板液浸泡微孔 30s，拍干，循環(huán)洗板 5 次；
避光添加顯色底物混合液 100μL，37℃避光顯色 14min；
終止液混勻微孔液體，450nm 讀數(shù)，計算 LIF 含量。
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關鍵字： 大鼠白血病抑制因子;LIF;ELISA試劑盒;
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