本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理,以預包被于酶標板的大鼠血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)特異性抗體為固相載體,捕獲待測樣本中的TSP-1抗原,加入酶標記特異性抗體形成固相夾心免疫復合物,洗滌去除游離雜質(zhì)后啟動酶促顯色反應,終止后測定吸光度,吸光度值與樣本中TSP-1含量成正比,借助標準曲線完成定量檢測。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:大鼠血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒
英文名稱:TSP-1 ELISA Kit
貨號:Y-E1213
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢測濃度0.06ng/mL
檢測范圍:0.15ng/mL - 30ng/mL
反應時間:總反應時長120分鐘
保存條件:2-8℃避光保存,高濃度抗體試劑-20℃保存
有效期:常規(guī)組件6個月,低溫試劑12個月
特異性:特異性結(jié)合大鼠TSP-1,與TSP家族其他亞型無交叉反應
重復性:板內(nèi)變異系數(shù)≤4.8%,板間變異系數(shù)≤6.8%
注意事項:實驗耗材需潔凈無蛋白污染,孵育溫度嚴格控制在37℃
試劑盒組成:

預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結(jié)合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標物,提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應,穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下:

試劑盒室溫放置 32min,稀釋洗滌緩沖液,配制 TSP-1 梯度標準液,待測血清樣本按比例稀釋備用。
酶標板分區(qū)標記孔位,空白孔加稀釋液,標準孔加梯度標品,樣本孔加待測樣本,每孔加入一步法酶抗體液,封板密封。
37℃避光孵育 62min,避免板面磕碰漏液。
棄除孔內(nèi)液體,洗滌液浸泡微孔 32s,傾倒廢液,洗板 5 次,每次拍干微孔。
加入顯色底物 AB 混合液,震蕩混勻,37℃避光顯色 17min。
加入終止液終止酶促反應,搖勻酶標板。
酶標儀 450nm 檢測 OD 值,換算得到樣本 TSP-1 濃度。
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關(guān)鍵字: 大鼠血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1;TSP-1;ELISA試劑盒;
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