雙抗體夾心 ELISA 體系，微孔板固定抗大鼠 β-TG 捕獲抗體，血漿樣本中釋放的 β 血小板球蛋白結合固相抗體，洗除游離蛋白后加入 HRP 標記抗 β-TG 檢測抗體形成夾心復合物，顯色測吸光度，標準曲線定量 β-TG 含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測靈敏度≤0.5ng/mL

檢測范圍：1ng/mL - 40ng/mL

反應時間：樣本孵育60分鐘，二抗孵育60分鐘，顯色15分鐘，總反應135分鐘

保存條件：所有試劑2-8℃避光冷藏保存，濃縮洗滌液低溫避光存放，防止結晶

有效期：原裝未拆封試劑盒有效期6個月

顯色系統(tǒng)：TMB底物顯色系統(tǒng)，酸性終止液終止顯色反應

檢測波長：450nm單波長檢測

標準曲線繪制：梯度稀釋標準品，檢測對應OD值，采用四參數(shù)Logistic擬合繪制標準曲線，換算樣本含量

特異性：特異性結合大鼠β-TG，與大鼠血小板相關同源蛋白無交叉反應，異種物種樣本無特異性結合

重復性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤9%，檢測數(shù)據(jù)穩(wěn)定性高

注意事項：1. 血漿樣本需嚴格抗凝處理，避免血小板激活影響檢測；2. 洗滌步驟嚴格按照次數(shù)及時長操作，杜絕非特異性吸附；3. 終止液具有腐蝕性，操作時做好防護；4. 試劑盒不同組分不可混用其他批次試劑。
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

試劑平衡：全部試劑室溫放置 27min，濃縮洗滌液 1:20 稀釋混勻備用。

標準品配制：β-TG 凍干標準品充分溶解，梯度稀釋 7 個濃度梯度。

加樣：標準孔 50μL 標準品，血漿樣本 50μL 加入檢測孔，空白孔稀釋液。

酶抗體孵育：每孔 50μL HRP-β-TG 抗體，密封 37℃避光孵育 68min。

洗板：洗滌液浸泡 37s，拍干，洗板 6 次。

顯色：底物 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 19min。

終止讀數(shù)：終止液搖勻，10min 內(nèi) 450nm 檢測，計算 β-TG 含量。