本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法原理，酶標(biāo)板預(yù)先包被大鼠血栓前體蛋白(TpP)特異性單克隆抗體，待測(cè)樣本中的TpP與包被抗體特異性結(jié)合，隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的TpP抗體形成免疫復(fù)合物，經(jīng)洗滌去除游離組分后加入顯色底物發(fā)生酶促顯色反應(yīng)，終止反應(yīng)后通過酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度值，樣本吸光度與TpP濃度成正比，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)定量大鼠樣本中TpP含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒
英文名稱：TpP ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1396
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度0.05ng/mL
檢測(cè)范圍：0.1ng/mL - 20ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：總反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)100分鐘
保存條件：試劑盒組件2-8℃保存，標(biāo)準(zhǔn)品分裝后-20℃冷凍保存
有效期：未開封整機(jī)6個(gè)月，分裝標(biāo)準(zhǔn)品3個(gè)月
特異性：僅特異性結(jié)合大鼠TpP，與凝血相關(guān)同源蛋白無(wú)交叉結(jié)合
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)≤5%，板間變異系數(shù)≤7%
注意事項(xiàng)：血清樣本需新鮮制備，避免反復(fù)凍融，洗滌液需充分洗滌去除殘留雜質(zhì)
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
提前 25min 取出試劑盒放置室溫回溫，按說明書比例濃縮洗滌液用純水稀釋配制成工作洗滌液，梯度稀釋 TpP 標(biāo)準(zhǔn)品。
酶標(biāo)板固定于板架，標(biāo)記空白、標(biāo)品、樣本孔；標(biāo)品孔加梯度 TpP 標(biāo)準(zhǔn)液，樣本孔加入預(yù)處理大鼠待測(cè)血漿樣本，空白孔加稀釋緩沖液，每孔同步加入酶標(biāo)記結(jié)合液，覆膜封板。
37℃恒溫環(huán)境避光孵育 55min，保證反應(yīng)體系穩(wěn)定結(jié)合抗原抗體復(fù)合物。
揭除封板膜，傾倒孔內(nèi)廢液，每孔注滿洗滌液靜置 25s 后倒扣甩凈，連續(xù)洗板 4 次，吸水紙徹底拍干微孔。
依次向各微孔添加顯色液 A 與顯色液 B，低速震蕩混勻，37℃遮光條件下顯色 12min。
每孔滴加終止液終止顯色反應(yīng)，水平輕搖酶標(biāo)板使溶液充分混合。
酶標(biāo)儀設(shè)置 450nm 檢測(cè)波長(zhǎng)，讀取各孔 OD 值，依托標(biāo)準(zhǔn)曲線換算樣本 TpP 濃度。
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關(guān)鍵字： 大鼠血栓前體蛋白;TpP;ELISA試劑盒;
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