本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔預(yù)包被大鼠RBP特異性抗體。待測(cè)樣本與標(biāo)準(zhǔn)品中的視黃醇結(jié)合蛋白抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的RBP檢測(cè)抗體，形成特異性免疫復(fù)合物。經(jīng)顯色、終止、吸光度檢測(cè)后，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)定量大鼠樣本中RBP的表達(dá)濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1071 |
英文名稱 | RBP ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)值0.3mg/L，適配血清微量轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白檢測(cè)。
檢測(cè)范圍：0.8mg/L - 60mg/L，適配大鼠血清、肝臟、腎臟組織樣本。
反應(yīng)時(shí)間：全程85分鐘，樣本溫育30分鐘、酶結(jié)合物溫育30分鐘、顯色25分鐘。
保存條件：2-8℃避光保存，洗滌液可室溫稀釋使用，不可久放。
有效期：未開封有效期9個(gè)月，開封后1個(gè)月內(nèi)使用完畢。
特異性：特異性識(shí)別大鼠RBP，與白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白無交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤6.5%，板間CV≤8.5%，轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白檢測(cè)穩(wěn)定性高。
注意事項(xiàng)：脂血樣本會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果，需使用清澈血清樣本；實(shí)驗(yàn)全程溫度恒定。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫回溫 31min，配比稀釋濃縮洗滌液，配制 RBP 系列標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，酶標(biāo)板分區(qū)標(biāo)記，大鼠血清樣本直接稀釋待測(cè)。
標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度 RBP 標(biāo)準(zhǔn)液 50μL，樣本孔加入稀釋血清樣本 50μL，空白孔加稀釋緩沖液 50μL，每孔加入酶偶聯(lián)二抗工作液 100μL，封板膜封口。
37℃避光孵育 63min，完成抗原抗體夾心捕獲。
撕掉封板倒掉廢液，洗滌液浸泡每孔 31s，循環(huán)洗板 5 次，拍干酶標(biāo)板底部水分。
每孔加入顯色底物 A、B 各 50μL，震蕩混勻，37℃避光顯色 18min。
滴加終止液 50μL 終止顯色，小幅搖晃酶標(biāo)板混勻反應(yīng)液。
450nm 波長(zhǎng)檢測(cè) OD 值，標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算 RBP 蛋白含量。
關(guān)鍵字： 大鼠視黃醇結(jié)合蛋白;RBP;ELISA試劑盒;
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