本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)原理，將純化的大鼠RBP-4特異性抗體固定于酶標(biāo)板表面作為固相載體。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，樣本、標(biāo)準(zhǔn)品中的RBP-4抗原被固相抗體特異性捕獲，洗去游離組分后，加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體構(gòu)建夾心復(fù)合物。底物顯色終止后檢測(cè)吸光度，數(shù)值與樣本RBP-4含量呈正相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)檢測(cè)大鼠視黃醇結(jié)合蛋白4的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1147 |
英文名稱 | RBP-4 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)下限0.2ng/mL，精準(zhǔn)檢測(cè)低豐度RBP-4蛋白。
檢測(cè)范圍：0.5ng/mL - 90ng/mL，適用于大鼠血清、脂肪組織、肝組織樣本。
反應(yīng)時(shí)間：總時(shí)長(zhǎng)95分鐘，抗原溫育40分鐘、二抗溫育30分鐘、顯色25分鐘。
保存條件：2-8℃密封冷藏，核心抗體避光保存，禁止冷凍。
有效期：原裝有效期12個(gè)月，多次取用后3周內(nèi)用完。
特異性：專一識(shí)別大鼠RBP-4，與RBP家族其他亞型無(wú)交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤9%，代謝標(biāo)志物檢測(cè)重復(fù)性好。
注意事項(xiàng)：脂肪組織樣本需充分脫脂處理，避免脂質(zhì)干擾抗原抗體結(jié)合。
儲(chǔ)存與有效期：
未開(kāi)封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒常溫平衡 26min，稀釋洗滌工作液，逐級(jí)稀釋 RBP-4 標(biāo)準(zhǔn)品，設(shè)定酶標(biāo)板各類檢測(cè)孔，大鼠腹腔液過(guò)濾后作為待測(cè)樣本。
標(biāo)準(zhǔn)孔加入 RBP-4 梯度標(biāo)準(zhǔn)液 50μL，樣本孔加入過(guò)濾待測(cè)腹腔液 50μL，空白孔添加稀釋液 50μL，全孔加入酶結(jié)合工作液 100μL，密封封板。
37℃避光孵育 53min，特異性免疫結(jié)合反應(yīng)。
去除封板棄液，洗滌液加滿每孔浸泡 37s，甩干洗板 4 次，清除游離雜蛋白。
每孔依次添加顯色 A 液、B 液各 50μL，混勻后 37℃避光顯色 15min。
加入終止液 50μL 終止顯色，水平振蕩酶標(biāo)板混勻體系。
酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定吸光度，計(jì)算樣本 RBP-4 濃度。
關(guān)鍵字： 大鼠視黃醇結(jié)合蛋白4;RBP-4;ELISA試劑盒;
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