本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA原理檢測大鼠樣本中HA含量。酶標板包被大鼠HA特異性結(jié)合抗體,特異性捕獲樣本中的透明質(zhì)酸抗原,經(jīng)溫育結(jié)合、洗板除雜后,加入酶標記的HA檢測抗體形成穩(wěn)定免疫復(fù)合物,利用底物酶促顯色反應(yīng)產(chǎn)生特異性吸光值,吸光度與HA含量呈正相關(guān),通過標準曲線擬合可精準測定大鼠HA的表達水平。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1405 |
英文名稱 | HA ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測限0.4ng/mL,精準檢測大鼠血清、組織液中透明質(zhì)酸含量。
檢測范圍:0.8ng/mL - 50ng/mL,適配大鼠肝纖維化、組織修復(fù)模型樣本檢測。
反應(yīng)時間:全程100分鐘,孵育70分鐘,顯色30分鐘。
保存條件:試劑2-8℃冷藏,多糖類抗原試劑避光保存,防止降解。
有效期:未開封有效期6個月,開封后1個月內(nèi)用完。
特異性:特異性結(jié)合大鼠透明質(zhì)酸,與其他黏多糖、糖胺聚糖無交叉反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤6.5%,板間CV≤8%,纖維化指標檢測數(shù)據(jù)穩(wěn)定。
注意事項:樣本避免反復(fù)凍融,防止HA多糖結(jié)構(gòu)降解,影響檢測結(jié)果。
關(guān)鍵注意事項:
實驗前需仔細閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
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實驗操作流程:
試劑盒室溫放置 30min,稀釋濃縮洗滌液,逐級稀釋 HA 標準品制備濃度梯度,拆分酶標板,多余板條密封冷藏。
標記酶標板孔位,標準品孔加入不同濃度標準溶液 50μL,樣本孔加入待測上清樣本 50μL,空白孔不加試劑。
檢測孔加入酶偶聯(lián)工作液 100μL,封板密封,37℃恒溫孵育 60min。
倒出孔內(nèi)廢液,洗滌液浸泡 35s 拍干,循環(huán)洗板 5 次。
加入顯色 A、B 液各 50μL,混勻避光,37℃顯色 17min。
滴加終止液 50μL 晃動酶標板終止反應(yīng)。
酶標儀 450nm 測 OD 值,計算樣本 HA 濃度。
關(guān)鍵字: 大鼠透明質(zhì)酸;HA;ELISA試劑盒;
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