本試劑盒依托固相雙抗體夾心酶免疫分析原理，將高特異性抗人FSP抗體固定于微孔板，加入梯度標準品和待測生物樣本，樣本內(nèi)的FSP抗原與固相抗體發(fā)生特異性免疫結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合成分后，加入辣根過氧化物酶標記的FSP檢測抗體，形成完整夾心免疫復合物，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后測定吸光度，結(jié)合標準曲線線性關(guān)系，定量檢測樣本中FSP的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：0.16ng/mL

檢測范圍：0.32-20.5ng/mL

反應(yīng)時間：樣本孵育 82min，二抗 52min，避光顯色 15min

保存條件：試劑盒 2-8℃，拆封后板條放入自封袋加干燥劑冷藏

顯色系統(tǒng)：常規(guī) TMB 顯色體系，終止后顏色穩(wěn)定 25min

檢測波長：450nm，參比 630nm

標準曲線繪制：采用 Logistic 四參數(shù)法繪制標準曲線

注意事項：成纖維細胞裂解樣本需充分離心去除細胞碎片，碎片會吸附抗體造成假陽性
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設(shè)置雙復孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

試劑盒常溫靜置 28min 回溫，稀釋一步法酶標記一抗液，規(guī)劃微孔板孔位。

各孔預加酶液 50μL，標準品孔加入梯度 FSP 標準品 50μL，樣品孔加待測樣本 50μL，空白孔加稀釋液。

封板 37℃孵育 65min，棄凈液體，洗板 5 次，每次浸泡 30s，拍干孔內(nèi)洗液。

依次添加顯色 A、B 液各 50μL，震蕩混勻。

避光 37℃顯色 14min。

加入終止液 50μL 終止反應(yīng)。

450nm 測 OD 值，計算樣本 FSP 濃度。