本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA技術原理，固相酶標板微孔包被純化的人著絲粒蛋白B特異性抗體，待測樣本、標準品中的CENP-B抗原可與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入酶標記CENP-B檢測抗體，形成完整免疫夾心復合物，經(jīng)TMB底物顯色、終止反應后，檢測各孔OD值，依據(jù)標準曲線線性關系，精準定量樣本中CENP-B蛋白含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA試劑盒
英文名稱：CENP-B ELISA Kit
貨號：Y-E3518
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢出 0.19AU/mL
檢測范圍：0.38AU/mL - 24.3AU/mL
反應時間：固相孵育 42min，二抗孵育 42min，顯色 13min
保存條件：2～8℃避光儲存，剩余微孔板條密封加干燥劑
顯色系統(tǒng)：TMB 顯色體系，酸性終止液終止
檢測波長：450nm 參比 620nm
標準曲線繪制：復孔均值計算，構建標準曲線換算抗體滴度
注意事項：自身免疫血清樣本建議稀釋兩個梯度防止超出檢測上限
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復溶后標準品：分裝 - 20℃凍存，避免反復凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
實驗步驟如下：
所有試劑室溫平衡 31min，梯度稀釋 CENP-B 標準品，細胞核裂解上清樣本稀釋處理，標記酶標板各微孔信息。
空白孔加樣本稀釋液，標準品孔添加不同濃度標準液，樣本孔加入待測裂解樣本，精準加樣無誤差。
一步法直接加入酶標記一抗二抗混合工作液，低速震蕩混勻 15s。
封板密封酶標板，37℃避光孵育 72min，全程避光存放。
倒掉孔內(nèi)反應液，洗板液浸泡每孔 30s，連續(xù)洗板 5 次并拍干殘留液體。
避光添加 TMB 顯色液，37℃避光顯色 16min，區(qū)分標準品梯度色差。
終止液終止反應，450nm 波長讀數(shù)，繪制標準曲線計算 CENP-B 蛋白含量。
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關鍵字： 人著絲粒蛋白B;CENP-B;ELISA試劑盒;
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