本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，酶標(biāo)板微孔固定抗人eIF3a特異性捕獲抗體，加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品及待測樣本后，樣本中的真核翻譯起始因子3a與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除游離組分，加入HRP標(biāo)記的eIF3a檢測抗體形成免疫復(fù)合物，顯色反應(yīng)后吸光度與抗原濃度呈正比，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合計算樣本中eIF3a的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人真核翻譯起始因子3a(eIF3a)ELISA試劑盒
英文名稱：eIF3a ELISA Kit
貨號：Y-E2935
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢出下限 0.28ng/L
檢測范圍：0.56ng/L - 36ng/L
反應(yīng)時間：抗原捕獲 55min，酶結(jié)合 45min，顯色 17min
保存條件：試劑盒全程 2-8℃，不可冷凍結(jié)冰
顯色系統(tǒng)：即用型 TMB 顯色液
檢測波長：450nm 單波長檢測
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：Origin 四參數(shù) Logistic 擬合生成標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項：細胞裂解液需去除核酸沉淀，避免吸附微孔板抗原
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下：
試劑盒室溫回溫 27min，倍比稀釋 eIF3a 標(biāo)準(zhǔn)品，細胞裂解液稀釋為待測樣本，對酶標(biāo)板進行孔位標(biāo)記。
依次加樣至空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、樣本孔，加樣槍垂直滴加，避免液體掛壁。
直接向全部微孔加入酶聯(lián)標(biāo)記抗體工作液，輕晃酶板混勻反應(yīng)體系。
封板封口，37℃恒溫避光孵育 68min，酶標(biāo)板平放于孵育箱內(nèi)。
棄液后洗板 4 次，每次浸泡 32s，倒扣酶板拍干微孔內(nèi)洗滌廢液。
避光加入顯色底物混合液，室溫顯色 14min，達到顯色梯度后終止。
加入終止液，酶標(biāo)儀 450nm 檢測吸光度，換算樣本 eIF3a 因子濃度。
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關(guān)鍵字： 人真核翻譯起始因子3a;eIF3a;ELISA試劑盒;
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