本試劑盒運用雙抗體夾心酶免疫分析原理，將抗人TS特異性抗體包被于微孔板表面，加入標準品與待測樣本后，樣本中的TS抗原與固相抗體發(fā)生特異性免疫結合，孵育充分反應后洗滌去除未結合組分，加入HRP標記的TS配對檢測抗體，形成夾心免疫復合物，TMB底物顯色、終止反應后檢測OD值，依據(jù)標準曲線精準測定樣本中TS的濃度。
產品參數(shù)：

?靈敏度：0.11ng/mL

檢測范圍：0.22-14.08ng/mL

反應時間：37℃孵育 70min，酶標抗體 45min，顯色 12min

保存條件：整套試劑 2-8℃，濃縮洗滌液結晶水浴融化即可使用

顯色系統(tǒng)：TMB 顯色體系，硫酸終止反應

檢測波長：450nm 單波長讀數(shù)

標準曲線繪制：四參數(shù)擬合標準曲線換算樣本 TS 蛋白濃度

注意事項：經化療藥物處理的腫瘤細胞樣本，TS 表達受藥物抑制，需同步設置細胞對照組
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。

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實驗操作流程：

試劑盒常溫放置 24min 復溫，配置一步法酶結合工作液，標記微孔板各組孔位。

每孔先加酶混合液 60μL，標準孔加梯度 TS 標準品 40μL，樣品孔加腫瘤細胞裂解液 40μL，空白孔加稀釋液 40μL。

封板 37℃孵育 59min，傾倒廢液，洗板 4 次，每次浸泡 27s，倒扣拍干孔板。

每孔加入 TMB 顯色底物 100μL，水平搖晃混勻。

室溫避光顯色 12min。

快速加入終止液 50μL 終止反應。

450nm 讀取吸光度，標準曲線定量 TS 表達量。