本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA檢測原理,微孔板包被高特異性抗人TSLP抗體,作為固相捕獲載體,加入梯度標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本,樣本內(nèi)的TSLP抗原與固相抗體特異性結(jié)合,洗滌去除非結(jié)合物質(zhì)后,加入HRP標(biāo)記的TSLP二抗完成夾心結(jié)合反應(yīng),底物顯色終止后檢測吸光度,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程測算樣本中TSLP的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E045 |
英文名稱 | TSLP Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:0.08pg/mL
檢測范圍:0.15~9.6pg/mL
反應(yīng)時(shí)間:37℃孵育 90min,二抗 60min,顯色 16min
保存條件:試劑盒 2-8℃,重組 TSLP 標(biāo)準(zhǔn)品 - 20℃分裝凍存
顯色系統(tǒng):超高靈敏度 TMB 底物顯色
檢測波長:450nm,630nm 扣除背景干擾
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:四參數(shù) Logistic 擬合 pg 級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項(xiàng):氣道上皮上清樣本避免反復(fù)凍融,TSLP 細(xì)胞因子極易失活
關(guān)鍵注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
試劑盒常溫靜置 25min 回溫,稀釋一步法酶結(jié)合抗體液,標(biāo)記微孔板孔位分組。
所有孔預(yù)先加入酶液 50μL,標(biāo)準(zhǔn)品孔加梯度 TSLP 標(biāo)準(zhǔn)液 50μL,待測孔加肺泡灌洗液樣本 50μL,空白孔加稀釋緩沖液。
封板 37℃孵育 63min,棄液洗板 5 次,每次浸泡 30s,吸水紙充分拍干。
分別添加顯色 A 液、B 液各 50μL,震蕩混勻微孔板。
避光 37℃顯色 14min。
加入終止液 50μL 終止反應(yīng)。
450nm 讀取 OD,換算 TSLP 樣本含量。
關(guān)鍵字: 人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素;TSLP;ELISA試劑盒;
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