本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，微孔板固相包被MYOG特異性捕獲抗體，加入待測樣本后，樣本內(nèi)肌細胞生成素抗原與固相抗體特異性結(jié)合，再加入酶標記MYOG檢測抗體構(gòu)建夾心復(fù)合物，經(jīng)洗滌去除未結(jié)合游離組分后，底物在酶的催化下顯色，顯色強度與樣本中MYOG含量成正比，通過吸光度檢測與標準曲線擬合，可定量測定人樣本中MYOG的濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：0.18ng/mL

檢測范圍：0.375ng/mL~12ng/mL

反應(yīng)時間：37℃樣本孵育 85min；二抗孵育 45min；顯色 20min

保存條件：試劑盒 2~8℃；濃縮標本稀釋液若渾濁需丟棄更換

顯色系統(tǒng)：雙組份 TMB 顯色液

檢測波長：450nm+620nm 校正波長

標準曲線繪制：以標準品稀釋濃度為橫坐標，校正后 OD 值縱坐標繪制標準曲線

注意事項：微孔板加樣順序統(tǒng)一，避免加樣時間差過大導(dǎo)致孔間誤差
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

樣本制備：肌肉組織裂解離心取上清，細胞上清樣本過濾去除雜質(zhì)，稀釋后渦旋混勻。

酶標板上樣：MYOG 預(yù)包被板分孔加樣，標準品、待測樣本、空白孔每孔加液 100μL。

一步法添加酶標二抗：直接加注 HRP 標記抗體工作液 50μL，混勻封板。

孵育反應(yīng)：37℃避光孵育 70min。

洗板操作：洗滌緩沖液洗板 6 次，每次浸泡 30s，倒置拍干。

底物顯色：加入顯色液避光孵育 16min。

終止上機：終止液終止顯色，酶標儀讀數(shù)，繪制標準曲線計算 MYOG 濃度。