本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理,酶標(biāo)板微孔固相包被人脂阿拉伯甘露聚糖特異性抗體,加入標(biāo)準(zhǔn)品及待測樣本后,樣本中的LAM抗原與固相抗體特異性免疫結(jié)合,洗滌去除游離雜質(zhì),加入酶標(biāo)記LAM檢測抗體形成夾心復(fù)合物,底物顯色后終止反應(yīng),吸光度數(shù)值與樣本中LAM含量成正比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可完成樣本中目標(biāo)物質(zhì)的定量檢測。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA試劑盒
英文名稱:LAM ELISA Kit
貨號:Y-E2615
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低可檢出 0.05ng/mL
檢測范圍:0.1ng/mL - 6.4ng/mL
反應(yīng)時(shí)間:捕獲孵育 60min,酶標(biāo)結(jié)合 50min,避光顯色 15min
保存條件:整套試劑 2~8℃,洗滌濃縮液室溫可長期存放
顯色系統(tǒng):OPD 顯色系統(tǒng)終止后測值
檢測波長:490nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:梯度標(biāo)準(zhǔn)品雙孔測定,取平均 OD 值建立曲線方程
注意事項(xiàng):結(jié)核樣本需生物安全二級環(huán)境操作,防止樣本氣溶膠污染
關(guān)鍵注意事項(xiàng):

本試劑盒僅科研體外檢測,嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃,溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會(huì)漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2~8℃冷鏈,嚴(yán)禁高溫暴曬。
實(shí)驗(yàn)步驟如下:

試劑室溫回溫 30min,倍比稀釋 LAM 標(biāo)準(zhǔn)品,痰液 / 胸水樣本稀釋處理,劃分酶標(biāo)板孔位用途。
空白孔添加樣本稀釋液,標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度 LAM 標(biāo)準(zhǔn)溶液,樣本孔加入待測體液樣本。
一步法直接加入酶結(jié)合特異性抗體工作液至所有微孔,震蕩混勻 10s。
封板封口,37℃避光孵育 70min,全程不可掀開封板。
棄除孔內(nèi)廢液,洗板液洗板 5 次,每次浸泡 35s,吸水紙徹底拍干微孔。
避光加入顯色底物混合液,37℃避光顯色 15min,梯度顯色清晰即可終止。
終止液終止顯色,450nm 測定吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 LAM 含量。
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關(guān)鍵字: 人脂阿拉伯甘露聚糖;LAM;ELISA試劑盒;
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