本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，微孔板預(yù)先固定抗人VE-cad特異性抗體，加入標(biāo)準(zhǔn)品與待測(cè)樣本后，樣本中的VE-cad抗原與固相抗體特異性結(jié)合，孵育完成免疫結(jié)合反應(yīng)后洗滌除雜，加入HRP標(biāo)記的VE-cad配對(duì)檢測(cè)抗體，形成穩(wěn)定的三元免疫復(fù)合物，底物顯色終止后檢測(cè)吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)算樣本中VE-cad的濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E2535 |
英文名稱 | VE-cad ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：0.06ng/mL
檢測(cè)范圍：0.1-6.4ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：室溫孵育 94min，二抗 62min，避光顯色 16min
保存條件：2～8℃避光，標(biāo)準(zhǔn)品凍干品復(fù)溶后一次性使用
顯色系統(tǒng)：高靈敏度底物顯色，適合內(nèi)皮細(xì)胞上清低濃度檢測(cè)
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm，600nm 參比波長(zhǎng)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：線性回歸構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)方程換算 VE-cad 復(fù)合體濃度
注意事項(xiàng)：細(xì)胞上清樣本不可劇烈震蕩，VE-cad 復(fù)合體易解聚導(dǎo)致檢測(cè)數(shù)值偏低
儲(chǔ)存與有效期：
未開(kāi)封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫平衡 26min，稀釋一步法酶標(biāo)抗體液，標(biāo)記微孔板各組實(shí)驗(yàn)孔。
各孔預(yù)加酶結(jié)合液 50μL，標(biāo)準(zhǔn)孔加梯度 VE-cad 標(biāo)準(zhǔn)液 50μL，待測(cè)孔加內(nèi)皮細(xì)胞裂解液 50μL，空白孔加緩沖液。
封板 37℃孵育 69min，棄凈孔內(nèi)液體，洗板 5 次，每次浸泡 31s，徹底拍干微孔板。
依次添加顯色 A 液、B 液各 50μL，輕微震蕩混勻。
避光 37℃顯色 17min。
加入終止液 50μL 終止顯色反應(yīng)。
450nm 測(cè) OD 值，計(jì)算 VE-cad 復(fù)合體含量。
關(guān)鍵字： 人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體;VE-cad;ELISA試劑盒;
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