本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，將抗人TRANCE特異性抗體包被于酶標(biāo)板微孔作為固相載體，加入標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本后，樣本中的腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子與固相抗體特異性結(jié)合，洗板去除未結(jié)合組分，加入HRP標(biāo)記檢測抗體形成夾心復(fù)合物，顯色深淺與TRANCE含量正相關(guān)，終止反應(yīng)后檢測吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線定量檢測樣本中目標(biāo)因子含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)ELISA試劑盒
英文名稱：TRANCE Elisa Kit
貨號：Y-E035
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢測限 0.15pg/mL
檢測范圍：0.3pg/mL - 19.2pg/mL
反應(yīng)時間：一抗孵育 40min，二抗 40min，顯色 15min
保存條件：試劑盒全程 2-8℃，不可置于冰箱冷凍層
顯色系統(tǒng)：即用型 TMB 顯色底物
檢測波長：450nm 參比 650nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：復(fù)孔檢測標(biāo)準(zhǔn)品，計算均值后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項：骨組織樣本勻漿后過濾去除鈣化顆粒，防止堵孔洗板不全
關(guān)鍵注意事項：
實驗前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下：
試劑盒室溫靜置 30min，梯度稀釋 TRANCE 標(biāo)準(zhǔn)品，細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本稀釋待測，標(biāo)注酶標(biāo)板各孔信息。
垂直加樣至對應(yīng)微孔，空白孔加稀釋液，標(biāo)準(zhǔn)孔加梯度 TRANCE 標(biāo)準(zhǔn)品，樣本孔加待測上清。
直接向全部微孔加入酶標(biāo)記抗體工作液，低速震蕩酶標(biāo)板 15s 混勻。
封板封口后 37℃避光孵育 68min，全程不可開啟封板。
棄去孔內(nèi)廢液，洗板液洗板 5 次，每次浸泡 30s，吸水紙徹底拍干微孔。
避光添加 TMB 顯色液，37℃避光顯色 16min，梯度色差清晰后終止。
加入終止液終止反應(yīng)，酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù)，計算 TRANCE 因子含量。
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關(guān)鍵字： 人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子;TRANCE;ELISA試劑盒;
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