本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測原理,微孔板包被有抗人GP-Ⅳ特異性抗體,加入標準品和待測血小板相關樣本后,樣本中的GP-Ⅳ抗原與固相抗體特異性結合,洗滌去除雜蛋白與游離組分,加入辣根過氧化物酶標記的GP-Ⅳ檢測抗體,孵育形成穩(wěn)定免疫復合物,洗滌后進行底物顯色,終止反應后檢測吸光度,通過標準曲線精準定量樣本中GP-Ⅳ的濃度。
產品參數:
產品名稱 | 人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E2770 |
英文名稱 | GP-Ⅳ ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測 0.09ng/mL
檢測范圍:0.312~20ng/mL
反應時間:封閉后樣本 70min,酶標抗體 35min,顯色 15min,總 120min
保存條件:2~8℃冷藏,終止液避免接觸金屬器皿
顯色系統(tǒng):TMB 單液顯色,稀硫酸終止反應
檢測波長:450nm 單波長測定
標準曲線繪制:八點稀釋標準品,線性回歸生成曲線
注意事項:全血樣本靜置時間不宜超過 30min 再分離上清
關鍵注意事項:
本試劑盒僅科研體外檢測,嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃,溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會造成非特異性結合,背景偏高。
終止后需快速讀數,放置過久吸光度會漂移,結果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2~8℃冷鏈,嚴禁高溫暴曬。
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實驗操作流程:
血小板裂解液稀釋處理:血小板裂解上清稀釋混勻,室溫靜置 8min;試劑盒整套試劑室溫復溫 29min。
微孔加樣封板孵育:各孔加入標準品、待測樣本與酶標記液,封板 37℃孵育 61min。
洗滌微孔:棄液后洗滌液浸泡 30s,洗板 5 次,拍干微孔液體。
避光顯色:添加顯色 A、B 液,混勻避光 37℃顯色 14min。
終止液終止反應:加終止液輕搖酶標板混勻。
檢測吸光度:450nm 讀取每孔 OD 值并記錄。
濃度換算:標準曲線計算稀釋后濃度,還原稀釋倍率得到 GP-Ⅳ 結果。
關鍵字: 人血小板膜糖蛋白Ⅳ;GP-Ⅳ;ELISA試劑盒;
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