本試劑盒采用間接夾心ELISA檢測(cè)原理，微孔板預(yù)先包被血小板特異性抗原，結(jié)合樣本中血小板相關(guān)IgM抗體后，洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì)，再加入酶標(biāo)記抗人IgM二抗，形成固相抗原-特異性IgM-酶標(biāo)二抗復(fù)合物，洗滌游離二抗后加入顯色底物顯色，終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，吸光度數(shù)值與樣本中PA-IgM含量正相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E2830 |
英文名稱 | PA-IgM ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：臨界 OD 值 0.07
檢測(cè)范圍：抗體相對(duì)濃度 1:20~1:2560
反應(yīng)時(shí)間：37℃孵育 90min，酶標(biāo)二抗 60min，顯色 22min，總 172min
保存條件：2~8℃避光存放，包被板不可彎折損壞孔底
顯色系統(tǒng)：雙組份 TMB 混合顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm 判讀吸光值
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：參考陽(yáng)性血清梯度稀釋，繪制滴度對(duì)應(yīng)曲線
注意事項(xiàng)：類風(fēng)濕因子陽(yáng)性血清易產(chǎn)生交叉反應(yīng)，需增設(shè)阻斷孔
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
血清樣本稀釋配比：待檢血清稀釋混勻，室溫靜置 6min；試劑盒所有組分室溫放置 30min 平衡溫度。
一步法共加樣孵育：微孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)血清與酶標(biāo)記二抗液，封板 37℃孵育 56min。
微孔洗滌：棄液洗滌浸泡 30s，洗板 4 次，吸水紙拍干微孔廢液。
避光顯色：加入顯色底物液混勻，37℃避光顯色 13min。
終止反應(yīng)：添加終止液搖勻終止顯色。
酶標(biāo)儀檢測(cè)：450nm 讀取各孔 OD 吸光度。
陰陽(yáng)性判定 + 定量：參照閾值判讀結(jié)果，標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 PA-IgM 抗體含量。
關(guān)鍵字： 人血小板相關(guān)抗體IgM;PA-IgM;ELISA試劑盒;
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