本試劑盒運(yùn)用間接酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)原理,固相載體酶標(biāo)板包被高純度軍團(tuán)菌抗原,待測(cè)樣本中的軍團(tuán)菌IgM抗體與微孔內(nèi)固相抗原特異性結(jié)合,經(jīng)過洗板去除游離雜質(zhì)后,加入酶標(biāo)記的抗人IgM特異性二抗,形成抗原-抗體-酶標(biāo)二抗復(fù)合物,經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后,利用酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度,對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可定量分析樣本中軍團(tuán)菌抗體IgM的表達(dá)水平。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:人軍團(tuán)菌抗體IgM(LP Ab-IgM )ELISA試劑盒
英文名稱:LP Ab-IgM Elisa Kit
貨號(hào):Y-E597
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢出限 0.12AU/mL
檢測(cè)范圍:0.2–12AU/mL
反應(yīng)時(shí)間:捕獲法包被板,樣本孵育 100min,酶標(biāo)二抗 45min,顯色 18min,總時(shí)長(zhǎng) 163min
保存條件:板條密封 2–8℃,底物液 2–8℃避光,終止液常溫密封保存
顯色系統(tǒng):可溶性 TMB 顯色底物
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:五點(diǎn)梯度標(biāo)準(zhǔn)品,四參數(shù)擬合曲線,用于定量 IgM 抗體濃度
注意事項(xiàng):類風(fēng)濕因子易干擾結(jié)果,高 RF 樣本建議預(yù)處理;嚴(yán)禁使用反復(fù)凍融超過 3 次的血清
關(guān)鍵注意事項(xiàng):

本試劑盒僅科研體外檢測(cè),嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無(wú)酶、無(wú)熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃,溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會(huì)漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2~8℃冷鏈,嚴(yán)禁高溫暴曬。
實(shí)驗(yàn)步驟如下:

樣本規(guī)范處理
血清樣本嚴(yán)禁溶血,溶血樣本直接廢棄;血清樣本 4℃可保存 2 天,長(zhǎng)期儲(chǔ)存分裝密封 - 20℃凍存,復(fù)融后充分渦旋混勻再檢測(cè)。
試劑盒平衡稀釋
所有試劑室溫靜置 32min;濃縮洗滌液用去離子水稀釋配制工作液,單次實(shí)驗(yàn)按需配制,不可長(zhǎng)期存放稀釋后洗滌液。
標(biāo)準(zhǔn)品孔布設(shè)
IgM 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后進(jìn)行梯度稀釋,從高濃度到低濃度依次加樣 50μL 至標(biāo)準(zhǔn)品孔,設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照孔、陰性對(duì)照孔各一孔。
一步法加樣孵育
待測(cè)樣本每孔 50μL,隨即加入酶標(biāo)二抗工作液 50μL,封板膜封口,37℃恒溫孵育 55min。
微孔洗滌操作
棄液后每孔加滿洗滌液,浸泡 30s,拍干,重復(fù)洗板 5 次,操作過程避免孔間液體交叉滴落。
避光顯色培育
每孔加入顯色液 A、B 各 50μL,輕柔混勻,遮光 37℃反應(yīng) 14min,不可強(qiáng)光直射酶標(biāo)板。
終止上機(jī)檢測(cè)
加入終止液終止反應(yīng),10min 內(nèi)使用酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù),根據(jù)臨界值判定軍團(tuán)菌 IgM 抗體陰陽(yáng)性結(jié)果。
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關(guān)鍵字: 人軍團(tuán)菌抗體IgM;LP Ab-IgM ;ELISA試劑盒;
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