本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，微孔板預(yù)先包被抗人PAIg特異性抗體，加入待測(cè)血小板樣本及標(biāo)準(zhǔn)品，樣本中的PAIg與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合組分，加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體形成免疫復(fù)合物，洗滌純化體系后進(jìn)行底物顯色，終止反應(yīng)后測(cè)定吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系，定量檢測(cè)樣本中PAIg的含量水平。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人血小板相關(guān)免疫球蛋白(PAIg)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E2795 |
英文名稱 | PAIg ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最小檢出 0.1μg/10?血小板
檢測(cè)范圍：0.4~25.6μg/10?血小板
反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育 75min，二抗 40min，顯色 18min，合計(jì) 133min
保存條件：試劑盒 2~8℃，底物液?jiǎn)为?dú)避光存放
顯色系統(tǒng)：?jiǎn)谓M分 TMB 顯色，鹽酸終止
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm 主波長(zhǎng)，600nm 參比
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：七點(diǎn)倍比稀釋，四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項(xiàng)：血小板計(jì)數(shù)需精準(zhǔn)，否則最終濃度換算存在巨大誤差
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū)，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
血小板處理上清稀釋：樣本上清用稀釋液稀釋混勻，室溫靜置 10min；試劑室溫平衡 32min。
加樣密封孵育：各微孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本與酶結(jié)合工作液，覆膜封口，37℃孵育 62min。
洗板流程：洗滌液浸泡微孔 35s，洗板 5 次，倒扣拍干微孔內(nèi)液體。
底物顯色：加入顯色 A、B 液避光混勻，37℃顯色 15min。
終止顯色反應(yīng)：準(zhǔn)時(shí)加入終止液輕搖混勻。
光度檢測(cè)：450nm 波長(zhǎng)測(cè)定 OD 值并逐條登記。
結(jié)果計(jì)算：繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線換算稀釋倍數(shù)，得到 PAIg 檢測(cè)數(shù)值。
關(guān)鍵字： 人血小板相關(guān)免疫球蛋白;PAIg;ELISA試劑盒;
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