本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理,微孔板包被有人HbCO特異性捕獲抗體,加入待測(cè)血液樣本及梯度標(biāo)準(zhǔn)品,樣本中的HbCO抗原與固相抗體特異性結(jié)合,洗滌去除未結(jié)合組分,加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的HbCO檢測(cè)抗體,孵育形成免疫復(fù)合物,充分洗滌后加入顯色底物顯色,終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)可精準(zhǔn)定量樣本中HbCO的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人一氧化碳血紅蛋白(HbCO)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E2794 |
英文名稱(chēng) | HbCO ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最小檢出 0.2% HbCO 占比
檢測(cè)范圍:0.5%~32% 血紅蛋白結(jié)合 CO 比例
反應(yīng)時(shí)間:樣本孵育 70min,二抗 35min,顯色 15min,合計(jì) 120min
保存條件:2~8℃避光,終止液具有腐蝕性,避免皮膚接觸
顯色系統(tǒng):TMB 顯色,稀硫酸終止變色
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm 主波長(zhǎng),650nm 參比
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制:梯度 CO 飽和血紅蛋白配置標(biāo)準(zhǔn)品,線(xiàn)性擬合曲線(xiàn)
注意事項(xiàng):采血后隔絕空氣密封送檢,空氣中氧氣會(huì)置換 CO 造成結(jié)果偏低
關(guān)鍵注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū),不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光,避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
全血紅細(xì)胞裂解稀釋?zhuān)嚎鼓呀饧t細(xì)胞后稀釋上清,混勻室溫靜置 10min;試劑室溫復(fù)溫 30min。
一步加樣孵育:微孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)裂解液與酶結(jié)合液,封板 37℃孵育 63min。
微孔洗滌:棄液洗滌浸泡 35s,洗板 5 次,拍干微孔殘留液體。
底物顯色:加入顯色 A、B 液避光混勻,37℃顯色 15min。
終止反應(yīng):滴加終止液輕搖酶標(biāo)板混勻。
吸光度檢測(cè):450nm 波長(zhǎng)讀取 OD 值逐條記錄。
數(shù)據(jù)計(jì)算:標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算稀釋倍率,得出 HbCO 含量結(jié)果。
關(guān)鍵字: 人一氧化碳血紅蛋白;HbCO;ELISA試劑盒;
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