本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測原理，在酶標板微孔中固定有抗人總前列腺特異抗原（tPSA）特異性單克隆抗體。檢測時，樣本與標準品中的tPSA抗原可與微孔內(nèi)固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除游離雜質(zhì)后，加入酶標記的抗tPSA抗體，構(gòu)建固相抗體-抗原-酶標抗體三明治復合物。再次洗滌洗凈未結(jié)合組分后，加入TMB顯色底物，酶促反應使底物顯色，終止液終止反應后穩(wěn)定顯色結(jié)果。通過檢測450nm處吸光度數(shù)值，依據(jù)吸光度與tPSA抗原含量的正相關關系，擬合標準曲線即可定量測定樣本中總前列腺特異抗原的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒
英文名稱：tPSA Elisa Kit
貨號：Y-E743
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測限 0.02ng/mL
檢測范圍：0.05ng/mL～40ng/mL
反應時間：一抗包被板樣本溫育 90min，二抗結(jié)合 45min，避光顯色 20min，終止后 5min 內(nèi)完成檢測，全程約 160min
保存條件：試劑盒整體 2～8℃冷藏；濃縮洗滌液室溫存放即可，顯色液必須避光 2～8℃保存，禁止反復凍融
顯色系統(tǒng)：雙組份 A+B TMB 顯色體系，臨用前等量混合配制
檢測波長：單波長 450nm 直接測定
標準曲線繪制：標準品梯度稀釋 7 個濃度點，OD 值采用線性回歸擬合標準曲線計算樣本濃度
注意事項：溶血、脂血樣本會嚴重干擾檢測結(jié)果；加樣順序嚴格遵循說明書，不可顛倒酶標試劑與底物添加順序。
關鍵注意事項：
實驗前需仔細閱讀對應試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下：
試劑盒所有組分室溫放置 30min 回溫，稀釋濃縮洗滌液至工作濃度，配制 tPSA 系列標準品。
酶標板設定標準品孔、樣本孔、陰性對照孔，精準加樣，每孔加樣后輕敲板邊混勻。
無需洗板，直接向全部反應孔加入辣根過氧化物酶標記抗體工作液，封板。
37℃濕盒內(nèi)避光孵育 45min，結(jié)束后傾倒孔內(nèi)液體，洗板 4 次，每次浸泡 25s，吸水紙拍凈殘留液體。
每孔加入顯色混合底物，遮光環(huán)境下 37℃顯色 12min，嚴控顯色時長避免過曝。
按順序加入終止液終止反應，水平搖晃酶標板使液體充分混勻。
酶標儀雙波長檢測 OD 數(shù)值，擬合標準曲線，換算待測樣本 tPSA 含量并記錄數(shù)據(jù)。
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關鍵字： 人總前列腺特異抗原;tPSA;ELISA試劑盒;
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