本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附檢測原理，微孔板預先包被乙胺碘呋酮固相抗原，加入待測樣本、標準品及酶標記抗體，樣本中的AD藥物分子與固相抗原競爭性結(jié)合有限的酶標特異性抗體，孵育平衡后洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)，加入顯色底物顯色，樣本中AD含量越高，顯色信號越弱，終止反應后檢測吸光度，通過標準曲線反向定量計算樣本中AD的藥物濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：檢出限 0.02μg/mL

檢測范圍：0.08~5.12μg/mL

反應時間：競爭法樣本孵育 80min，酶標二抗 45min，顯色 17min，總 142min

保存條件：試劑盒 2~8℃，競爭結(jié)合液開封后一次性使用完畢

顯色系統(tǒng)：單液 TMB 顯色終止

檢測波長：450nm 單波長測定

標準曲線繪制：競爭抑制模式，五參數(shù)擬合標準曲線

注意事項：藥物體內(nèi)代謝產(chǎn)物會發(fā)生交叉反應，需結(jié)合臨床用藥史判讀
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

血清藥物樣本稀釋：服藥后血清樣本稀釋混勻，室溫靜置 9min；整套試劑盒室溫復溫 30min。

一步共加樣免疫孵育：各孔加入標準品、待測血清與酶結(jié)合試劑，封板 37℃孵育 62min。

洗滌微孔：棄液洗滌浸泡 35s，洗板 5 次，吸水紙拍干微孔殘留液體。

避光顯色：添加顯色雙液震蕩混勻，37℃避光顯色 16min。

終止顯色：加入終止液終止酶促反應。

光度檢測：450nm 波長測定 OD 值逐條記錄。

血藥濃度換算：標準曲線計算稀釋后 AD 濃度，還原稀釋倍率得到血藥含量。