本試劑盒采用間接ELISA檢測原理，將純化的異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物（hnRNP/RA33）抗原包被于酶標(biāo)板微孔表面。檢測時(shí)，樣本中的抗hnRNP/RA33抗體可與固相抗原發(fā)生特異性結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合的非特異性成分后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗人免疫球蛋白二抗，與樣本特異性抗體結(jié)合。經(jīng)洗滌純化反應(yīng)體系后，加入TMB底物啟動(dòng)顯色反應(yīng)，顯色強(qiáng)度與樣本中抗RA33抗體含量呈正相關(guān)，終止反應(yīng)后檢測吸光度，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可完成樣本中目標(biāo)抗體的定量檢測。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)ELISA試劑盒
英文名稱：hnRNP/RA33 Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E447
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢出 0.8RU/mL
檢測范圍：1.6RU/mL～200RU/mL
反應(yīng)時(shí)間：37℃封閉后加樣孵育 120min，二抗孵育 70min，避光顯色 30min，終止讀板，總時(shí)長 220min
保存條件：試劑盒 2～8℃避光存放；顯色液單獨(dú)避光冷藏，不可與強(qiáng)酸試劑混放
顯色系統(tǒng)：改良型 TMB 顯色底物，硫酸終止液終止反應(yīng)
檢測波長：450nm，參比 630nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：采用五點(diǎn)定標(biāo)法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，取復(fù)孔平均值剔除離散值
注意事項(xiàng)：類風(fēng)濕相關(guān)樣本建議新鮮檢測；洗板步驟不能省略，否則非特異吸附會(huì)造成假陽性結(jié)果。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫回溫 30min，稀釋濃縮洗滌液，配置 RA33 抗體陽性標(biāo)準(zhǔn)品梯度液。
酶標(biāo)板依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測血漿樣本、陰陽對(duì)照樣本，做好孔位標(biāo)記。
一步法加入酶標(biāo)記抗體工作液，密封封板，37℃恒溫孵育 60min。
去封板膜，甩干液體，連續(xù)洗板 5 次，每次浸泡 28s，吸水紙吸干殘留洗液。
加入顯色底物 A、B 混合液，避光室溫顯色 15min。
加入終止液終止顯色反應(yīng)，水平搖晃酶標(biāo)板混勻。
雙波長檢測 OD 值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量抗 RA33 抗體水平。
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關(guān)鍵字： 異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體;hnRNP/RA33;ELISA試劑盒;
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