本試劑盒采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗原理,將純化的脫氧核糖核蛋白(DNP)抗原固定于微孔板表面,待測樣本中的抗DNP抗體可與固相DNP抗原特異性結合;孵育結束后洗板清除未結合的游離雜質(zhì),加入辣根過氧化物酶標記的抗人二抗與固相上的DNP-Ab結合,形成穩(wěn)定免疫復合物;經(jīng)洗板純化后加入底物顯色,顯色強度與樣本中DNP-Ab抗體含量成正比,終止反應后檢測吸光度,通過標準曲線完成定量檢測。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)ELISA試劑盒
英文名稱:DNP-Ab Elisa Kit
貨號:Y-E481
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:0.36IU/mL
檢測范圍:0.72IU/mL - 23.04IU/mL
反應時間:兩步孵育 67min、44min,顯色 15min
保存條件:2~8℃避光存放,洗滌濃縮液按比例稀釋后使用
顯色系統(tǒng):雙組份底物顯色體系
檢測波長:450nm
標準曲線繪制:7 點標準品線性回歸,用于狼瘡篩查與病情監(jiān)測
注意事項:藥物性狼瘡也可出現(xiàn)陽性,需結合用藥史區(qū)分原發(fā)性與藥物誘導自身免疫反應
關鍵注意事項:

本試劑盒僅科研體外檢測,嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃,溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會造成非特異性結合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會漂移,結果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2~8℃冷鏈,嚴禁高溫暴曬。
實驗步驟如下:

試劑盒室溫平衡 30min,取出預裝包被微孔板,設置并標記各類實驗孔,多余板條密封置于 2~8℃環(huán)境保存。
稀釋待測樣本加入樣本孔 64μL,陰陽性對照孔添加對應對照試劑 64μL,空白孔空置不加樣。
一步法直接加入酶標記二抗液 64μL 至所有非空白孔,覆膜密封,緩慢震蕩酶標板混勻體系。
37℃恒溫避光孵育 67min,全程遠離強光與紫外線照射。
撕開封板膜,倒凈廢液,洗滌液注滿每孔浸泡 37s 甩干,重復洗板 6 次,徹底拍干微孔內(nèi)部水分。
每孔加入顯色混合底物液 100μL,37℃避光顯色 10min。
快速加入終止液 50μL 終止反應,混勻后 10min 內(nèi) 450nm 讀取 OD 值,依據(jù)標準曲線判讀 DNP 抗體檢測結果。
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關鍵字: 人抗脫氧核糖核蛋白抗體;DNP-Ab;ELISA試劑盒;
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