本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測原理，微孔板預(yù)先包被人INH特異性捕獲抗體，加入標(biāo)準(zhǔn)品與待測血清樣本，樣本中的抑制素抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除游離組分，加入酶標(biāo)記INH檢測抗體構(gòu)建免疫復(fù)合物，充分洗滌后進(jìn)行酶促顯色反應(yīng)，終止顯色后檢測吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線精準(zhǔn)定量樣本中INH的濃度水平。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測 0.08pg/mL

檢測范圍：0.312~20pg/mL

反應(yīng)時間：樣本結(jié)合 80min，酶二抗 40min，顯色 19min，總 139min

保存條件：2~8℃避光，微孔板避免重壓導(dǎo)致包被層脫落

顯色系統(tǒng)：雙組份 TMB 混合顯色體系

檢測波長：450nm 為主波長，600nm 參比

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：七點倍比稀釋，四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線

注意事項：性激素節(jié)律周期會影響體內(nèi)抑制素水平，建議固定采血時段
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護(hù)

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

血清樣本梯度稀釋：育齡期血清樣本稀釋渦旋混勻，室溫靜置 7min；試劑盒室溫復(fù)溫 26min。

加樣密封孵育：微孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測血清與酶工作液，覆膜封口，37℃孵育 59min。

微孔洗滌：棄液洗滌浸泡 30s，洗板 4 次，吸水紙拍干微孔廢液。

底物顯色：加入顯色雙液避光混勻，37℃顯色 13min。

終止反應(yīng)：添加終止液終止顯色并搖勻。

儀器讀取 OD：450nm 波長檢測吸光度數(shù)值存檔。

激素定量：標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本 INH 激素濃度。