本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法原理,酶標(biāo)板微孔內(nèi)包被有小鼠CD19分子特異性捕獲抗體。檢測(cè)時(shí),樣本、標(biāo)準(zhǔn)品中的小鼠CD19抗原與固相捕獲抗體特異性結(jié)合,洗去未結(jié)合雜質(zhì)后,加入HRP標(biāo)記的小鼠CD19檢測(cè)抗體,形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體免疫復(fù)合物。充分洗滌去除游離酶標(biāo)抗體后,加入TMB底物進(jìn)行酶促顯色,顯色深淺與樣本中CD19分子含量成正比,終止反應(yīng)后測(cè)定吸光度值,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可定量計(jì)算樣本中小鼠CD19分子的濃度。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:小鼠CD19分子(CD19)ELISA試劑盒
英文名稱:CD19 ELISA Kit
貨號(hào):Y-E2035
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最小檢出 0.09ng/mL
檢測(cè)范圍:0.18ng/mL~35ng/mL
反應(yīng)時(shí)間:37℃樣本孵育 70min,酶結(jié)合物 42min,底物顯色 14min,終止后立即讀數(shù),全程 126min
保存條件:試劑盒 2~8℃冷藏,禁止冷凍;未用完板條密封加干燥劑 2~8℃可存放 10 天
顯色系統(tǒng):預(yù)制單組分 TMB 顯色液
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm 主波長(zhǎng),620nm 校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:六參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)品設(shè)置復(fù)孔,偏差大于 15% 該孔作廢重測(cè)
注意事項(xiàng):脾臟淋巴細(xì)胞裂解樣本需充分離心去除細(xì)胞碎片;所有操作避免氣溶膠交叉污染。
關(guān)鍵注意事項(xiàng):

本試劑盒僅科研體外檢測(cè),嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃,溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會(huì)漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2~8℃冷鏈,嚴(yán)禁高溫暴曬。
實(shí)驗(yàn)步驟如下:

試劑盒室溫平衡 22min,稀釋洗滌液至使用濃度,倍比稀釋小鼠 CD19 標(biāo)準(zhǔn)品。
酶標(biāo)板設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)細(xì)胞裂解液樣本孔、空白孔,垂直緩慢加樣減少氣泡。
直接加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體,覆膜封板,37℃避光孵育 58min。
揭膜棄液,洗板 6 次,每次注滿洗液靜置 25s,倒扣拍干微孔。
加入顯色工作液,避光顯色 13min。
加入終止液終止反應(yīng),輕震酶標(biāo)板混勻。
450nm 測(cè) OD 值,計(jì)算樣本 CD19 蛋白濃度。
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關(guān)鍵字: 小鼠CD19分子;CD19;ELISA試劑盒;
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