雙抗體夾心 ELISA,酶標(biāo)板包被抗大鼠 CD30 捕獲抗體,樣本細(xì)胞膜 / 可溶性 CD30 結(jié)合板底,HRP 標(biāo)記檢測抗體形成夾心復(fù)合物,洗滌顯色測吸光度,定量淋巴細(xì)胞活化標(biāo)志物 CD30。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠CD30分子(CD30)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1570 |
英文名稱 | CD30 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測限0.05ng/mL,超高靈敏度,可檢測低表達(dá)水平的大鼠CD30分子
檢測范圍:0.1ng/mL - 100ng/mL,適配大鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織裂解液樣本檢測
反應(yīng)時間:總反應(yīng)時長130分鐘,樣本溫育65分鐘,酶結(jié)合物溫育30分鐘,顯色15分鐘,終止平衡5分鐘
保存條件:全套試劑2 - 8℃避光冷藏保存,洗滌液室溫密封保存即可,凍干標(biāo)準(zhǔn)品開封后-20℃分裝保存
有效期:原裝未拆封有效期6個月,凍干標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后7天內(nèi)用完,避免活性失效
顯色系統(tǒng):TMB雙組分顯色體系,A、B液現(xiàn)配現(xiàn)用,顯色梯度清晰,區(qū)分度高
檢測波長:主檢測波長450nm,輔助校正波長570nm,降低實驗背景誤差
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:7點梯度標(biāo)準(zhǔn)濃度設(shè)置,四參數(shù)擬合曲線,R2≥0.996,濃度梯度覆蓋高低值區(qū)間,擬合精度高
特異性:專一性結(jié)合大鼠CD30抗原,與大鼠CD系列其他分子、炎癥因子無交叉反應(yīng),特異性極強(qiáng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤5%,板間CV≤7%,批次間實驗數(shù)據(jù)一致性好
注意事項:血漿樣本需選用EDTA抗凝,避免肝素抗凝干擾抗原結(jié)合;所有試劑使用前需回溫至室溫;洗滌步驟充分,避免殘留洗液導(dǎo)致背景偏高;禁止使用過期試劑
關(guān)鍵注意事項:
實驗前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
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實驗操作流程:
試劑平衡:試劑盒室溫靜置 30min,洗滌液 1:20 稀釋,淋巴細(xì)胞上清混勻。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋:CD30 標(biāo)準(zhǔn)品溶解梯度稀釋 6 梯度,空白對照孔。
加樣孵育:每孔 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品 / 樣本,酶結(jié)合物 50μL,37℃避光密封孵育 66min。
洗板操作:洗滌液浸泡 36s,充分拍干,洗板 6 次。
底物顯色:底物 A、B 各 50μL,避光孵育 18min。
終止讀數(shù):終止液混勻,10min 內(nèi) 450nm 讀數(shù)。
數(shù)據(jù)計算:標(biāo)準(zhǔn)曲線檢測 CD30,評估淋巴細(xì)胞活化狀態(tài)。
關(guān)鍵字: 大鼠CD30分子;CD30;ELISA試劑盒;
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