雙抗體夾心酶聯(lián)免疫原理，微孔板預(yù)包被補(bǔ)體 BF 捕獲抗體，樣本中補(bǔ)體 B 因子結(jié)合固相載體，酶標(biāo)記檢測(cè)抗體結(jié)合靶蛋白，洗板顯色后讀取 OD 值，標(biāo)準(zhǔn)曲線定量體液內(nèi)補(bǔ)體 BF 濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測(cè)靈敏度可達(dá)0.1ng/mL，可精準(zhǔn)檢測(cè)樣本中微量BF含量，無假陰性干擾

檢測(cè)范圍：0.2ng/mL - 80ng/mL，覆蓋大鼠血清、組織勻漿、細(xì)胞上清液中BF常規(guī)表達(dá)濃度區(qū)間

反應(yīng)時(shí)間：整體實(shí)驗(yàn)操作時(shí)長(zhǎng)120分鐘，包含樣本孵育60分鐘、酶標(biāo)孵育30分鐘、顯色反應(yīng)15分鐘、終止穩(wěn)定5分鐘

保存條件：試劑盒未開封整體2 - 8℃冷藏保存，嚴(yán)禁冷凍；開封后板條密封避光2 - 8℃保存，試劑避免室溫久置

有效期：未開封原裝試劑盒有效期6個(gè)月，嚴(yán)格按保存條件儲(chǔ)存可穩(wěn)定保質(zhì)；開封后建議1個(gè)月內(nèi)用完

顯色系統(tǒng)：TMB單組分顯色液顯色，底物特異性結(jié)合酶標(biāo)抗體，顯色均勻穩(wěn)定，無背景雜色

檢測(cè)波長(zhǎng)：酶標(biāo)儀標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)波長(zhǎng)450nm，參考波長(zhǎng)630nm，消除孔底反光、氣泡干擾

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：采用6點(diǎn)梯度標(biāo)準(zhǔn)品稀釋濃度，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值為縱坐標(biāo)，擬合四參數(shù)邏輯曲線，線性相關(guān)系數(shù)R2≥0.995

特異性：僅特異性識(shí)別大鼠B因子，與大鼠其他補(bǔ)體因子、同源蛋白無交叉反應(yīng)，與小鼠、兔等異種物種蛋白無交叉結(jié)合

重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)CV≤6%，板間變異系數(shù)CV≤8%，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好，數(shù)據(jù)偏差可控

注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)所用槍頭、離心管需無熱源、無酶污染；樣本需新鮮制備，避免反復(fù)凍融；顯色過程嚴(yán)格避光，終止后15分鐘內(nèi)完成上機(jī)檢測(cè)；嚴(yán)格把控孵育溫度與時(shí)間，避免溫育偏差影響結(jié)果
試劑盒組成：

預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物

標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)

生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)

辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化

終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果

濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)

封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

試劑平衡：試劑室溫放置 25min，20× 洗滌液稀釋，血清樣本無溶血污染。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：BF 凍干標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶梯度稀釋 6 組濃度，空白調(diào)零孔。

加樣孵育：50μL 標(biāo)準(zhǔn)品 / 樣本 + 50μL 酶標(biāo)記抗體，封膜 37℃避光孵育 60min。

洗板操作：洗滌液浸泡 30s，拍干，洗板 5 次。

底物顯色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 15min。

終止讀數(shù)：終止液混勻，10min 內(nèi)讀取吸光度。

數(shù)據(jù)計(jì)算：定量補(bǔ)體 B 因子，評(píng)價(jià)補(bǔ)體旁路激活水平。