雙抗體夾心 ELISA 體系，板底包被抗大鼠 Bcl-2 捕獲抗體，樣本抗凋亡蛋白 Bcl-2 結(jié)合固相抗體，酶標(biāo)二抗形成夾心復(fù)合物，洗滌顯色后依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量細胞、組織中 Bcl-2 含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1191 |
英文名稱 | Bcl-2 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度0.15ng/mL，抗凋亡蛋白精準(zhǔn)檢測
檢測范圍：0.3ng/mL - 30ng/mL
反應(yīng)時間：總時長95分鐘，樣本孵育65分鐘，二抗孵育30分鐘
保存條件：2-8℃避光保存，嚴(yán)禁冷凍蛋白試劑
有效期：未開封原裝6個月有效
顯色系統(tǒng)：穩(wěn)定TMB顯色體系，細胞蛋白檢測穩(wěn)定性強
檢測波長：450nm主波長檢測
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：6濃度梯度，四參數(shù)擬合，R2≥0.996
特異性：特異性結(jié)合Bcl-2蛋白，與BAX、Bid等凋亡蛋白無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤4.8%，板間CV≤6.8%
注意事項：細胞樣本充分裂解，去除細胞碎片；避免樣本反復(fù)凍融，防止蛋白失活
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實驗操作流程：
試劑平衡：試劑盒室溫平衡 27min，濃縮洗滌液 1:20 稀釋，細胞上清室溫平衡。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：Bcl-2 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋配制 6 梯度標(biāo)準(zhǔn)液，空白對照孔。
加樣孵育：各孔 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品、樣本，酶結(jié)合物 50μL，37℃避光孵育 63min。
洗板操作：洗滌液浸泡 33s，拍干殘液，洗板 5 次。
底物顯色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 16min。
終止讀數(shù)：終止液混勻，9min 內(nèi)讀取 450nm 吸光值。
數(shù)據(jù)計算：標(biāo)準(zhǔn)曲線定量抑凋亡 Bcl-2 蛋白表達。
關(guān)鍵字： 大鼠B細胞淋巴瘤因子2;Bcl-2;ELISA試劑盒;
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