本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理,酶標板微孔包被純化的大鼠EGF特異性捕獲抗體,加入標準品及大鼠待測樣本后,樣本中的EGF抗原與固相抗體特異性結(jié)合,洗板去除未結(jié)合雜質(zhì),加入酶標記的EGF檢測抗體形成夾心免疫復(fù)合物,經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后,測定吸光度值,吸光度與EGF濃度呈正相關(guān),結(jié)合標準曲線完成定量檢測。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒
英文名稱:EGF ELISA Kit
貨號:Y-E1433
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢測濃度≤0.7pg/mL
檢測范圍:2pg/mL - 700pg/mL
反應(yīng)時間:總時長3.3小時,快速定量檢測
保存條件:2-8℃低溫避光保存
有效期:原裝6個月,穩(wěn)定性強
顯色系統(tǒng):高靈敏生長因子專屬顯色體系
檢測波長:450nm/630nm雙波長校正
標準曲線繪制:8梯度濃度,R2≥0.996
特異性:特異性識別大鼠EGF,與FGF、VEGF等生長因子無交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤6.8%,板間CV≤8.8%
注意事項:生長因子易降解,樣本采集后低溫保存;孵育溫度嚴格恒定37℃
關(guān)鍵注意事項:

實驗前需仔細閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下:

EGF 標準品梯度稀釋,試劑盒室溫平衡 27min,分置酶標板三組微孔;
各微孔添加 50μL 標準品或大鼠體液樣本,空白孔添加等量稀釋緩沖液;
即刻加入 100μL 酶標抗 EGF 抗體,覆膜封閉;
37℃避光孵育 59min,一步共孵育抗原抗體結(jié)合;
洗板液浸泡微孔 30s,徹底拍干,洗滌 6 次;
避光添加顯色底物混合液 100μL,37℃避光顯色 15min;
終止液混勻液體,450nm 測 OD 值,計算 EGF 表達水平。
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關(guān)鍵字: 大鼠表皮生長因子;EGF;ELISA試劑盒;
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