Biotin標(biāo)記的CD30抗體
原理特點(diǎn)
本抗體通過生物素（Biotin）共價(jià)標(biāo)記制備，依托生物素-親和素級(jí)聯(lián)放大系統(tǒng)原理，可結(jié)合標(biāo)記親和素的熒光或酶底物，實(shí)現(xiàn)信號(hào)多級(jí)放大?？贵w特異性識(shí)別腫瘤壞死因子受體超家族成員CD30蛋白，該蛋白主要表達(dá)于活化T細(xì)胞、B細(xì)胞及霍奇金淋巴瘤、間變性大細(xì)胞淋巴瘤腫瘤細(xì)胞，是淋巴瘤診斷與分型的關(guān)鍵標(biāo)志物。該標(biāo)記方式靈敏度極高、背景干凈，適配免疫組化、ELISA、免疫印跡等多種實(shí)驗(yàn)，可實(shí)現(xiàn)低豐度CD30蛋白的精準(zhǔn)檢測(cè)。
英文名稱:CD30 Rabbit pAb, Biotin conjugated
中文名稱:Biotin標(biāo)記的CD30抗體
英文別名：CD 30; CD30 antigen; CD30L receptor; Cytokine receptor CD30; D1S166E; KI 1; Ki 1 antigen; Ki-1 antigen; KI1; Lymphocyte activation antigen CD30; TNFRSF 8; TNFRSF8; TNR8_HUMAN; Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily Member 8; Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily Member 8.
標(biāo)記物：Biotin（生物素，適配鏈霉親和素?zé)晒?/ 酶顯色放大系統(tǒng)）
靶蛋白：CD30（TNFRSF8，120kDaⅠ 型跨膜糖蛋白，Ki-1 抗原）
經(jīng)典克?。?/span>BerH8（鼠源 IgG1 κ）
種屬：人
驗(yàn)證應(yīng)用：流式、免疫組化 IHC、WB、免疫熒光
蛋白功能：淋巴細(xì)胞活化標(biāo)志物，霍奇金淋巴瘤、間變大細(xì)胞淋巴瘤特征標(biāo)志物
檢測(cè)優(yōu)勢(shì)：生物素標(biāo)記可信號(hào)放大，適合弱表達(dá)抗原檢測(cè)
儲(chǔ)存：4℃避光保存
靶點(diǎn)背景
1. CD30 屬于腫瘤壞死因子受體超家族，主要表達(dá)于活化 T/B 淋巴細(xì)胞、霍奇金淋巴瘤細(xì)胞
2. 調(diào)控淋巴細(xì)胞增殖、凋亡與存活，異常高表達(dá)是淋巴瘤特征性分子表型
3. 用于淋巴瘤病理分型、免疫表型鑒定、靶向治療靶點(diǎn)驗(yàn)證
樣本處理與實(shí)驗(yàn)操作
1. Western Blot（免疫印跡）
樣本制備
細(xì)胞樣本：PBS洗滌2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑），冰上裂解30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清，BCA法定量蛋白濃度
組織樣本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，離心后取上清，調(diào)整蛋白濃度至一致
變性處理：加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘，冷卻后上樣
抗體孵育
轉(zhuǎn)膜完成后，用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時(shí)
一抗稀釋后4℃孵育過夜（12-16小時(shí)），或室溫孵育1-2小時(shí)；孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘；加入二抗（1:5000-1:10000稀釋）室溫孵育1-2小時(shí)
再次洗滌后，用ECL發(fā)光液顯影，通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P（石蠟切片免疫組化）
樣本前處理
脫蠟水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分鐘），最后用PBS沖洗
抗原修復(fù)：將切片放入檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波爐加熱至沸騰，保持10-15分鐘，自然冷卻至室溫
封閉處理：3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內(nèi)源性過氧化物酶，PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上，4℃孵育過夜；孵育時(shí)置于濕盒中，防止液體揮發(fā)
次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入二抗（生物素標(biāo)記）室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后，加入ABC復(fù)合物室溫孵育30分鐘，DAB顯色劑顯色（顯微鏡下觀察控制時(shí)間，通常3-10分鐘），蘇木素復(fù)染后脫水封片
3. ICC/IF（細(xì)胞免疫熒光）
樣本制備
細(xì)胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度，PBS洗滌2次，4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理（根據(jù)抗體類型選擇）：0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次
封閉處理：5% BSA室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上，4℃孵育過夜，或室溫孵育1-2小時(shí)
PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入熒光標(biāo)記二抗（1:200-1:500稀釋），室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后，用抗淬滅封片液封片，熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）
包被與封閉
用包被緩沖液（如碳酸鹽緩沖液pH9.6）稀釋抗原至合適濃度，每孔加入100μl，4℃包被過夜
棄去包被液，PBST洗滌3次，每次3分鐘；加入封閉液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小時(shí)
抗體孵育
一抗按比例稀釋后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小時(shí)，或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次，加入稀釋好的酶標(biāo)二抗，每孔100μl，37℃孵育1小時(shí)
洗滌后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光顯色10-20分鐘，加入終止液（2M H?SO?），用酶標(biāo)儀在450nm波長讀取OD值
公司正在出售的產(chǎn)品
人特異性抗原單克隆抗體 | PE-Cy7標(biāo)記的兔抗猴IgM | Phospho-Stat2 (Tyr690) Antibody Blocking Peptide |
異質(zhì)性核糖核蛋白C1/C2重組兔單抗 | Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 | NPC2 Antibody Blocking Peptide |
CAP1重組兔單抗 | Cy5標(biāo)記的兔抗豬IgG | COX7B2 Antibody Blocking Peptide |
小泛素樣修飾蛋白4重組兔單抗 | Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗人IgG | RALGAPA1 Antibody Blocking Peptide |
凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白ASC重組兔單抗 | Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豬IgG | CTn1 Antibody Blocking Peptide |
鉀通道相互作用蛋白3抗體 | Cy3標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG | phospho-IKK beta (Ser466) Antibody Blocking Peptide |
聚磷酸肌醇磷酸酶4B重組兔單抗 | Biotin標(biāo)記的CD30抗體Cy5標(biāo)記的兔抗人IgA | c20orf72 Antibody Blocking Peptide |
同源盒蛋白C11抗體 | PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG | Recombinant human FcRn protein, C-His-Avi (HEK293) |
卟膽原脫氨酶重組兔單抗 | Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗雞IgM | CHRNA1(97-116) Peptide |
關(guān)鍵字： Biotin標(biāo)記的CD30抗體;CD30 Rabbit pAb, Bio;100ul;
上海研生實(shí)業(yè)有限公司成立于2011年專業(yè)銷售各種科學(xué)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。旗下有“上研生"品牌。
我們努力將歐美進(jìn)口品牌的產(chǎn)品推薦給各類研究人員；另一方面也非常重視國內(nèi)科研市場(chǎng)的產(chǎn)品開發(fā)，推出了一系列具有競(jìng)爭(zhēng)力的產(chǎn)品和服務(wù)。
同時(shí)國家對(duì)于生物行業(yè)的發(fā)展給予極大的重視，更多地側(cè)重于科研的投入。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)在同行獲得認(rèn)可。也具備豐富的管理經(jīng)驗(yàn)，同時(shí)我們建立了集技術(shù)支持、售后服務(wù)等多方位的服務(wù)體系。我們有激情、有理想，更有責(zé)任感，是您科研道路上值得信賴的伙伴。
公司的理念是：以誠信為本，努力打造優(yōu)質(zhì)品牌，為您提供產(chǎn)品的售中、售后服務(wù)。