BF555標(biāo)記的Ki67抗體
原理特點(diǎn)
本抗體以BF555橙紅色熒光標(biāo)記,特異性識(shí)別增殖細(xì)胞核抗原Ki67,Ki67僅表達(dá)于增殖期細(xì)胞,靜止期細(xì)胞不表達(dá),是評(píng)估細(xì)胞增殖活性、腫瘤增殖指數(shù)的金標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)志物。該抗體特異性強(qiáng)、染色均勻,可精準(zhǔn)標(biāo)記腫瘤細(xì)胞、干細(xì)胞等增殖細(xì)胞,BF555熒光抗淬滅性好,適合組織切片免疫組化熒光染色、細(xì)胞增殖定量分析、腫瘤惡性程度評(píng)估及細(xì)胞周期相關(guān)研究。
英文名稱:Ki-67 Rabbit pAb, BF555 conjugated
中文名稱:BF555標(biāo)記的Ki67抗體
英文別名:Antigen identified by monoclonal antibody Ki 67; Antigen KI67; KIA; Ki67; MKI67; Proliferation related Ki 67 antigen; Antigen KI-67; KI67_HUMAN.
靶標(biāo):Ki-67(MKI67),增殖細(xì)胞核標(biāo)志物,僅表達(dá)于分裂期細(xì)胞,G0 靜息期陰性
熒光標(biāo)記:BF555;Ex=555 nm,Em=572 nm
抗體類型:兔多克隆 / 兔重組單克隆
種屬反應(yīng):人、小鼠、大鼠、猴
適用實(shí)驗(yàn):組織 IHC 增殖染色、IF、流式增殖分型、ICC
功能用途:腫瘤增殖指數(shù)評(píng)估、干細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、藥效增殖抑制檢測(cè)
儲(chǔ)存:-20℃避光分裝
靶點(diǎn)背景
1. Ki67 為增殖細(xì)胞核內(nèi)蛋白,僅在細(xì)胞分裂周期(G1/S/G2/M)表達(dá),G0 靜息期陰性
2. 定量反映細(xì)胞增殖活躍程度,增殖指數(shù)是病理評(píng)估關(guān)鍵參數(shù)
3. 腫瘤惡性程度分級(jí)、組織增殖活性、藥物抗增殖效果評(píng)價(jià)金標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)志物
實(shí)驗(yàn)操作過程注意事項(xiàng)
抗體稀釋
使用專用抗體稀釋液或含BSA的緩沖液稀釋抗體,避免用純水稀釋(純水中無鹽分會(huì)導(dǎo)致抗體變性);
嚴(yán)格按照說明書的建議稀釋比例進(jìn)行稀釋,若說明書未提供,可通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳稀釋比例(通常1:500-1:10000);
稀釋后的抗體需一次性用完,未用完的部分不可再次凍存。
抗體孵育
一抗孵育:通常4℃孵育過夜,可減少非特異性結(jié)合,避免室溫孵育時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致抗體變性;
二抗孵育:室溫孵育1-2小時(shí),孵育期間需避光(熒光二抗);
孵育時(shí)需保證抗體均勻覆蓋樣本表面,避免產(chǎn)生氣泡;
實(shí)驗(yàn)過程中使用封閉液(如5%BSA或脫脂牛奶)封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn),減少背景信號(hào)。
洗滌步驟
每步孵育后,需用PBST或TBST洗滌3-5次,每次5分鐘,徹底去除未結(jié)合的抗體;
洗滌時(shí)需輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)板或載玻片,避免用力過猛導(dǎo)致樣本脫落;
洗滌液需新鮮配制,避免使用過期或變質(zhì)的洗滌液。
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關(guān)鍵字: BF555標(biāo)記的Ki67抗體;Ki-67 Rabbit pAb, BF;100ul;
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