本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測原理制備,微孔板固相包被有抗小鼠Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)特異性抗體。檢測體系中,樣本及標準品中的Qa-2抗原可與固相抗體特異性結(jié)合,洗滌去除未結(jié)合組分后,加入辣根過氧化物酶標記的配對檢測抗體,構(gòu)建穩(wěn)定的免疫夾心復(fù)合物。后續(xù)加入TMB底物發(fā)生酶促顯色反應(yīng),顯色強度與樣本中Qa-2抗原含量呈正相關(guān),終止反應(yīng)后通過酶標儀檢測吸光度,對照標準曲線即可精準定量樣本中小鼠Qa-2抗原的含量。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:小鼠Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)ELISA試劑盒
英文名稱:Qa-2 ELISA Kit
貨號:Y-E2060
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:檢出限 0.22ng/mL
檢測范圍:0.45ng/mL~22ng/mL
反應(yīng)時間:室溫孵育樣本 95min,酶標記物 55min,避光顯色 22min,終止檢測,總時長 172min
保存條件:試劑盒 2~8℃避光;濃縮洗滌液室溫儲存,稀釋后洗滌液 2~8℃3 天內(nèi)用完
顯色系統(tǒng):雙液混合 TMB 顯色體系
檢測波長:僅 450nm 單波長測定
標準曲線繪制:倍比稀釋標準品,半對數(shù)擬合標準曲線用于樣本定量
注意事項:避免試劑結(jié)冰失效;終止液具有腐蝕性,操作佩戴一次性手套。
關(guān)鍵注意事項:

本試劑盒僅科研體外檢測,嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃,溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2~8℃冷鏈,嚴禁高溫暴曬。
實驗步驟如下:

試劑盒室溫放置 26min 回溫,配制洗滌工作液,梯度稀釋 Qa-2 標準品。
酶標板各孔添加標準品、待測小鼠組織樣本上清、空白稀釋液,加樣完畢標記板框。
一步添加酶結(jié)合物工作液,密封封板,37℃孵育 62min。
傾倒孔內(nèi)液體,洗板 5 輪,每輪浸泡 32s,充分拍干微孔內(nèi)液體。
避光加入顯色底物,室溫顯色 16min。
加入終止液終止顯色,混勻體系。
酶標儀讀板,通過標準曲線換算 Qa-2 抗原含量。
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關(guān)鍵字: 小鼠Qa淋巴細胞抗原2;Qa-2;ELISA試劑盒;
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