本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA檢測原理，酶標(biāo)板微孔內(nèi)包被有小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2（sMHC-2）特異性抗體。檢測過程中，樣本、標(biāo)準(zhǔn)品中的sMHC-2抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合雜質(zhì)后，加入HRP標(biāo)記的配對(duì)檢測抗體，形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體免疫復(fù)合物。再次洗滌后加入TMB底物進(jìn)行酶促顯色，顯色深淺與樣本中sMHC-2含量呈正相關(guān)，終止反應(yīng)后檢測吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可精準(zhǔn)測定樣本中目標(biāo)蛋白的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒
英文名稱：sMHC-2 ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2077
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢出限 0.09ng/mL
檢測范圍：0.2ng/mL～29ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：37℃溫育 74min，二抗 43min，底物顯色 14min，終止后立即測讀，合計(jì) 131min
保存條件：試劑盒 2～8℃避光保存；所有試劑不可冷凍結(jié)冰
顯色系統(tǒng)：HRP 催化單組份 TMB 顯色
檢測波長：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：六組梯度濃度線性回歸擬合曲線，R2 需大于 0.99
注意事項(xiàng)：心肌樣本避免反復(fù)凍融；洗板拍干力度輕柔，防止包被膜脫落。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫放置 31min 回溫，稀釋洗滌液，倍比稀釋 sMHC-2 標(biāo)準(zhǔn)品。
酶標(biāo)板布設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、待測組織上清孔、空白對(duì)照孔，依次加樣。
一步加入酶結(jié)合物工作液，密封封板，37℃避光孵育 70min。
棄液洗板 6 次，每次浸泡 26s，拍干微孔殘液。
TMB 顯色液遮光顯色 19min。
終止液終止顯色反應(yīng)，混勻體系。
讀取吸光度數(shù)值，定量目標(biāo)蛋白濃度。
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關(guān)鍵字： 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2;sMHC-2;ELISA試劑盒;
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