本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔內(nèi)包被有小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6（IGFBP-6）特異性抗體。檢測(cè)過程中，樣本與標(biāo)準(zhǔn)品中的IGFBP-6抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除非特異性結(jié)合組分后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的配對(duì)檢測(cè)抗體，構(gòu)建穩(wěn)定的免疫夾心復(fù)合物。后續(xù)加入TMB底物進(jìn)行酶促顯色，顯色深淺與樣本中IGFBP-6含量呈正相關(guān)，終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可完成樣本中目標(biāo)蛋白的定量檢測(cè)。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)ELISA試劑盒
英文名稱：IGFBP-6 ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2072
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢出下限 0.05ng/mL
檢測(cè)范圍：0.11ng/mL～33ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：37℃樣本孵育 76min，二抗 45min，底物顯色 17min，終止讀板，總時(shí)長(zhǎng) 138min
保存條件：試劑盒 2～8℃冷藏，禁止凍存任意組分；工作稀釋液現(xiàn)配現(xiàn)用
顯色系統(tǒng)：HRP 介導(dǎo)單組份 TMB 顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù) Logistic 回歸構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，復(fù)孔偏差＞12% 需重測(cè)
注意事項(xiàng)：血漿樣本添加抗凝劑不可選用肝素，會(huì)干擾抗原抗體結(jié)合。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫放置 35min 回溫，稀釋洗滌液，配制 IGFBP-6 系列標(biāo)準(zhǔn)稀釋液。
酶標(biāo)板布設(shè)標(biāo)準(zhǔn)梯度孔、待測(cè)血清樣本孔、空白對(duì)照孔，規(guī)范加樣。
一步加入酶標(biāo)記檢測(cè)液，密封封板，37℃避光孵育 73min。
棄液洗板 5 次，浸泡 30s 每輪，吸水紙拍干微孔。
避光顯色 17min。
滴加終止液終止顯色，搖晃酶標(biāo)板混勻。
依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算樣本 IGFBP-6 濃度。
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關(guān)鍵字： 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6;IGFBP-6;ELISA試劑盒;
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