本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，微孔板固相固定有小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類（MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ）特異性抗體。檢測(cè)時(shí)，樣本、標(biāo)準(zhǔn)品中的MHC-Ⅱ抗原與固相捕獲抗體特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合的非特異性物質(zhì)后，加入HRP標(biāo)記的配對(duì)檢測(cè)抗體，構(gòu)建固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體免疫復(fù)合物。再次洗滌后加入TMB底物進(jìn)行酶促顯色，顯色強(qiáng)度與樣本中MHC-Ⅱ抗原含量成正比，終止反應(yīng)后測(cè)定吸光度，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可完成定量檢測(cè)。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA試劑盒
英文名稱：MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2092
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢出 0.16ng/mL
檢測(cè)范圍：0.32ng/mL～31ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：37℃溫育 96min，酶標(biāo)記物 56min，避光顯色 22min，終止讀數(shù)，總時(shí)長(zhǎng) 174min
保存條件：整套試劑盒 2～8℃避光；濃縮洗滌液常溫長(zhǎng)期儲(chǔ)存無(wú)變質(zhì)風(fēng)險(xiǎn)
顯色系統(tǒng)：雙組份配比混合 TMB 顯色體系
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm+650nm 雙波長(zhǎng)校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：半對(duì)數(shù)坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，用于樣本定量換算
注意事項(xiàng)：抗原提呈細(xì)胞裂解樣本去除核酸雜質(zhì)；加樣不可產(chǎn)生氣泡遮擋光路。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見(jiàn)光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無(wú)酶、無(wú)熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過(guò)久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫放置 32min 平衡溫度，稀釋濃縮洗滌液，配制 H-2Ⅱ 標(biāo)準(zhǔn)梯度液。
酶標(biāo)板分孔精準(zhǔn)加樣標(biāo)準(zhǔn)品、免疫細(xì)胞上清樣本、空白對(duì)照。
直接加入酶標(biāo)記結(jié)合工作液，封板 37℃孵育 62min。
洗板 4 次，浸泡 29s / 輪，棄凈廢液拍干微孔。
避光顯色底物反應(yīng) 16min。
加入終止液終止反應(yīng)，震蕩酶標(biāo)板混勻。
檢測(cè) OD 值，擬合曲線定量 MHC-Ⅱ 含量。
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關(guān)鍵字： 小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類;MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ;ELISA試劑盒;
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