本試劑盒基于聚合酶鏈式反應技術(shù)，特異性針對灰馬杜拉分枝菌的保守基因序列設計引物，可精準檢測樣本中該致病菌的核酸成分。試劑盒配套齊全、操作簡便，特異性強，不會與其他分枝桿菌、真菌及常見雜菌發(fā)生交叉反應，靈敏度高，能夠快速甄別臨床、環(huán)境樣本中的灰馬杜拉分枝菌感染情況，為馬杜拉菌病的早期診斷、流行病學調(diào)查及防控治理提供精準的分子檢測依據(jù)。
產(chǎn)品名稱 | 灰馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P014392 |
英文名稱 | Madurella griseaPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎原理：
提取樣本中灰馬杜拉分枝菌基因組 DNA，采用特異性引物靶向該菌獨有保守基因片段，經(jīng)高溫變性、低溫退火、延伸循環(huán)擴增靶標核酸。
擴增過程嵌入熒光標記探針，僅與灰馬杜拉分枝菌擴增產(chǎn)物結(jié)合釋放熒光信號，依據(jù)熒光有無判定菌株存在。
配套陰性、陽性對照同步擴增，排除核酸提取抑制物、引物非特異性結(jié)合造成的假陽性 / 假陰性干擾。
?操作步驟?：
樣本制備：
使用CTAB法或商業(yè)DNA提取試劑盒從組織中提取基因組DNA。
建議DNA濃度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反應體系配制（20 μL體系示例）：
預混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特異性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
補充無核酸酶水至終體積。
PCR擴增程序：
預變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）；
熔解曲線分析：60~95℃（可選，用于驗證擴增特異性）。
結(jié)果判讀：
陽性：Ct值≤35且熔解曲線峰單一；
陰性：Ct值≥40或無擴增曲線；
可疑：35<Ct值<40，建議復測或結(jié)合熔解曲線分析。
?注意事項?：
所有耗材必須無核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復吸??；
陽性模板拷貝濃度高，開蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴增產(chǎn)物、實驗廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測，禁止人體臨床檢測；
移液器、操作臺定期紫外消毒，長期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
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關鍵字： 灰馬杜拉分枝菌;PCR檢測試劑盒;
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