?產品名稱:組織胞漿菌通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Histoplasm spp.PCR
貨號:YS-P014293
分類:PCR檢測試劑盒
規(guī)格?:50T/盒
檢測原理:
病灶樣本酶解破碎真菌細胞壁,磁珠純化真菌基因組 DNA
通用引物靶向組織胞漿菌屬保守基因,識別該屬全部菌種
熔解曲線分析法區(qū)分陽性真菌與宿主組織非特異性擴增信號
實驗流程:
樣本處理(樣本處理區(qū))
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸,避免交叉污染。
試劑配制(試劑準備區(qū))
反應體系(20μL/管):19μL反應液 + 1μL酶液,分裝后加入5μL待測核酸或質控品。
PCR擴增(核酸擴增區(qū))
循環(huán)參數(shù):
預變性:95℃ 2min(1循環(huán));
擴增:95℃ 15sec → 60℃ 30sec(45循環(huán),60℃時采集熒光信號,F(xiàn)AM通道)。
結果分析
陽性:Ct值≤40,擴增曲線呈指數(shù)增長;
陰性:無Ct值或曲線平直;
可疑:40<Ct≤45,需復測確認。
質控要求:陽性質控Ct≤32,陰性質控無擴增。
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注意事項:
所有試劑避免反復凍融,可分裝小體積凍存;融化后冰上放置不超過 2 h,酶失活會直接導致無擴增條帶
陽性質粒拷貝數(shù)極高,開蓋全程在生物安全柜操作,防止氣溶膠污染實驗室
所有耗材必須無核酸酶,槍頭一次性使用;實驗后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測,嚴禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸,減少抑制劑干擾
關鍵字: 組織胞漿菌通用;PCR檢測試劑盒;
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