本試劑盒靶向田鼠分枝桿菌保守基因序列設(shè)計PCR擴增體系，可精準檢測嚙齒動物樣本中的田鼠分枝桿菌核酸。該菌是嚙齒動物結(jié)核病主要病原，可跨界感染其他動物，試劑盒檢測精準、特異性強，適用于野生動物疫病監(jiān)測、養(yǎng)殖環(huán)境病原溯源、人畜共患病防控。
產(chǎn)品名稱 | 田鼠分枝桿菌PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P014460 |
英文名稱 | Mycobacterium microtiPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
嚙齒動物臟器病灶提取分枝桿菌 DNA，引物靶向田鼠分枝桿菌特有毒力片段擴增。
終點 PCR 電泳鑒定目標核酸條帶。
健康田鼠組織陰性對照，排除宿主基因組干擾。
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴增（核酸擴增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時采集熒光信號，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴增曲線呈指數(shù)增長；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測確認。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴增。
?注意事項?：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會直接導(dǎo)致無擴增條帶
陽性質(zhì)?？截悢?shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實驗室
所有耗材必須無核酸酶，槍頭一次性使用；實驗后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測，嚴禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
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關(guān)鍵字： 田鼠分枝桿菌;PCR檢測試劑盒;
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