?產(chǎn)品名稱：產(chǎn)氣克雷伯氏菌PCR檢測試劑盒
英文名稱：Klebsiella aerogenesPCR
貨號：YS-P014350
分類：PCR檢測試劑盒
規(guī)格?：50T/盒
檢測原理：
糞便、污水樣本離心富集細(xì)菌，酶裂解細(xì)胞壁純化細(xì)菌 DNA
特異性引物靶向產(chǎn)氣克雷伯菌產(chǎn)氣代謝特有基因，區(qū)分同屬其他菌種
毛細(xì)管電泳區(qū)分?jǐn)U增片段長度，精準(zhǔn)鑒別產(chǎn)氣克雷伯菌株
實驗流程：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴(kuò)增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時采集熒光信號，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
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注意事項：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會直接導(dǎo)致無擴(kuò)增條帶
陽性質(zhì)粒拷貝數(shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實驗室
所有耗材必須無核酸酶，槍頭一次性使用；實驗后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
關(guān)鍵字： 產(chǎn)氣克雷伯氏菌;PCR檢測試劑盒;
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