?產(chǎn)品名稱:三叉奧斯特線蟲PCR檢測試劑盒
英文名稱:Ostertagia trifurcataPCR
貨號:YS-P014543
分類:PCR檢測試劑盒
規(guī)格?:50T/盒
檢測原理:
裂解樣本中三叉奧斯特線蟲蟲卵,釋放核酸并去除糞便雜質(zhì)獲得模板。
引物靶向三叉奧斯特線蟲獨有基因,保證僅該蟲核酸可被擴增。
PCR 富集微量核酸信號,實現(xiàn)三叉奧斯特線蟲的核酸篩查。
實驗流程:
1. 樣本處理
提取待測樣本RNA,建議使用商品化RNA提取試劑盒。
2. 陽性對照稀釋(示例:6個梯度)
標(biāo)記離心管(7至2號),每管加入45μL模板稀釋液。
按10倍梯度稀釋陽性對照,避免交叉污染。
3. PCR反應(yīng)體系配制(20μL/反應(yīng))
| 組分 | 體積(μL) |
| RT-PCR反應(yīng)液 | 10 |
| 熒光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 補至20 |
4. 上機程序
逆轉(zhuǎn)錄:50℃ 15分鐘(可選,根據(jù)病毒RNA特性調(diào)整)。
預(yù)變性:95℃ 2分鐘。
循環(huán):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集熒光信號),共40循環(huán)。
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注意事項:
1、實驗分區(qū)管理?
實驗全程需嚴(yán)格劃分三個獨立區(qū)域:?試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴增區(qū)?,各區(qū)實驗服、移液器及耗材?嚴(yán)禁混用?,防止交叉污染。
?2、防止污染操作?
使用帶濾芯槍頭,每步更換槍頭;
陽性對照操作應(yīng)在專用生物安全柜中進行,避免污染其他試劑;
加樣后立即蓋緊管蓋,避免氣溶膠擴散。
?3、試劑保存與使用?
所有試劑需?-20℃避光保存?,避免反復(fù)凍融,確保穩(wěn)定性;
使用前于冰上解凍并輕柔混勻,瞬時離心后使用。
關(guān)鍵字: 三叉奧斯特線蟲;PCR檢測試劑盒;
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