?產(chǎn)品名稱：海藻巴斯德菌=海藻百伯史坦菌PCR檢測試劑盒
英文名稱：Pasteurella trehalosi（=)PCR
貨號(hào)：YS-P014566
分類：PCR檢測試劑盒
規(guī)格?：50T/盒
檢測原理：
以海藻巴斯德菌（海藻百伯史坦菌）特異性毒力相關(guān)基因作為擴(kuò)增靶點(diǎn)提取樣本細(xì)菌 DNA。
引物僅匹配該菌種基因序列，溫控?cái)U(kuò)增過程抑制近緣菌非特異性擴(kuò)增，提升檢測專一性。
讀取擴(kuò)增產(chǎn)物信號(hào)，陽性結(jié)果代表樣本檢出海藻巴斯德菌核酸。
實(shí)驗(yàn)流程：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴(kuò)增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時(shí)采集熒光信號(hào)，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
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注意事項(xiàng)：
所有耗材必須無核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸??；
陽性模板拷貝濃度高，開蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴(kuò)散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴(kuò)增產(chǎn)物、實(shí)驗(yàn)廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動(dòng)植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測，禁止人體臨床檢測；
移液器、操作臺(tái)定期紫外消毒，長期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
關(guān)鍵字： 海藻巴斯德菌=海藻百伯史坦菌;PCR檢測試劑盒;
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