本試劑盒基于分子擴(kuò)增技術(shù)，特異性檢測有輪瑞氏絳蟲的特征性基因片段，可精準(zhǔn)鑒別該類絳蟲感染樣本，規(guī)避其他絳蟲種類的檢測干擾。有輪瑞氏絳蟲多寄生于禽類體內(nèi)，易引發(fā)宿主消化道病變，本試劑盒可適配禽類糞便、腸道組織等樣本檢測，操作便捷、檢出率高，適用于禽類養(yǎng)殖疫病篩查、寄生蟲病流行病學(xué)調(diào)查、畜禽產(chǎn)品安全檢測及相關(guān)寄生蟲病原研究工作。
產(chǎn)品名稱 | 有輪瑞氏絳蟲PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P014664 |
英文名稱 | Raillietina cesticillusPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
引物序列匹配有輪瑞氏絳蟲特有的基因片段，可避免同屬其他絳蟲出現(xiàn)交叉擴(kuò)增造成假陽性。
從宿主糞便、組織等樣本中提取絳蟲基因組 DNA，作為 PCR 擴(kuò)增的反應(yīng)模板。
通過擴(kuò)增產(chǎn)物大小或熒光信號判斷樣本是否感染有輪瑞氏絳蟲，實(shí)現(xiàn)病原分子鑒別。
?操作步驟?：
1. DNA提?。颖局苽鋮^(qū)）
使用自選方法或兼容試劑盒提取樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（獨(dú)立操作區(qū)）
標(biāo)記6管為梯度稀釋點(diǎn)（如7-2），每管加45 μL DEPC水。
取5 μL陽性對照依次稀釋，混勻后作為標(biāo)準(zhǔn)品（避免污染）。
3. PCR反應(yīng)體系配制（試劑配制區(qū)）
按以下比例配制（示例）：
| 組分 | 體積（μL） |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上機(jī)檢測
程序設(shè)置：預(yù)變性95℃ 3 min；40循環(huán)（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲線分析。
數(shù)據(jù)分析：根據(jù)Ct值及標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
?注意事項(xiàng)?：
試劑盒含生物源性質(zhì)粒模板，操作全程佩戴手套、口罩，陽性模板僅在生物安全柜開蓋；
所有一次性耗材、PCR 廢液、電泳凝膠實(shí)驗(yàn)后 121℃高壓滅菌再丟棄；
試劑避免反復(fù)凍融，單次融化冰上放置不超過 2 h，使用完畢立即放回 - 20℃；
移液器吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸取，防止交叉污染；
試劑盒僅用于科研檢測，嚴(yán)禁人臨床體外診斷；
擴(kuò)增產(chǎn)物區(qū)產(chǎn)物不可帶回試劑、提取區(qū)，防止氣溶膠大面積污染實(shí)驗(yàn)室；
若陰性對照持續(xù)出現(xiàn)雜帶，全部更換全新試劑盒，實(shí)驗(yàn)室臺面、移液器紫外過夜消毒。
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關(guān)鍵字： 有輪瑞氏絳蟲;PCR檢測試劑盒;
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