?產(chǎn)品名稱：擬態(tài)弧菌PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Vibrio mimicusPCR
貨號(hào)：YS-P014911
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格?：50T/盒
檢測(cè)原理：
特異性引物靶向擬態(tài)弧菌獨(dú)有毒力基因保守區(qū)段，僅能與該菌基因組 DNA 完成互補(bǔ)退火配對(duì)，排除近緣弧菌交叉擴(kuò)增干擾。
通過(guò) Taq DNA 聚合酶在變性、退火、延伸三步循環(huán)中指數(shù)級(jí)擴(kuò)增目標(biāo)核酸片段，將微量初始模板放大至可電泳檢出濃度。
擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳，依據(jù)條帶大小與試劑盒陽(yáng)性對(duì)照條帶比對(duì)，判定樣本內(nèi)是否存在擬態(tài)弧菌。
實(shí)驗(yàn)流程：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測(cè)核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴(kuò)增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時(shí)采集熒光信號(hào)，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽(yáng)性：Ct值≤40，擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長(zhǎng)；
陰性：無(wú)Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測(cè)確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽(yáng)性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
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注意事項(xiàng)：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過(guò) 2 h，酶失活會(huì)直接導(dǎo)致無(wú)擴(kuò)增條帶
陽(yáng)性質(zhì)粒拷貝數(shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無(wú)核酸酶，槍頭一次性使用；實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過(guò)期禁止使用
僅限科研檢測(cè)，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測(cè)場(chǎng)景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
關(guān)鍵字： 擬態(tài)弧菌;PCR檢測(cè)試劑盒;
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