?產(chǎn)品名稱:假結(jié)核耶爾森菌PCR檢測試劑盒
英文名稱:Yersinia pseudotuberculosisPCR
貨號:YS-P014936
分類:PCR檢測試劑盒
規(guī)格?:50T/盒
檢測原理:
引物選取假結(jié)核耶爾森菌 yopH 毒力基因保守序列,可精準(zhǔn)區(qū)別于小腸結(jié)腸炎耶爾森菌。
從臨床樣本中提取細(xì)菌 DNA,借助 PCR 循環(huán)擴增富集目標(biāo)毒力基因片段。
設(shè)置近緣菌陰性對照,規(guī)避親緣菌種同源序列引發(fā)的非特異性擴增。
實驗流程:
1. 樣本處理
提取待測樣本RNA,建議使用商品化RNA提取試劑盒。
2. 陽性對照稀釋(示例:6個梯度)
標(biāo)記離心管(7至2號),每管加入45μL模板稀釋液。
按10倍梯度稀釋陽性對照,避免交叉污染。
3. PCR反應(yīng)體系配制(20μL/反應(yīng))
| 組分 | 體積(μL) |
| RT-PCR反應(yīng)液 | 10 |
| 熒光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 補至20 |
4. 上機程序
逆轉(zhuǎn)錄:50℃ 15分鐘(可選,根據(jù)病毒RNA特性調(diào)整)。
預(yù)變性:95℃ 2分鐘。
循環(huán):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集熒光信號),共40循環(huán)。
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注意事項:
避免反復(fù)凍融試劑,解凍后需充分混勻。
實驗環(huán)境需嚴(yán)格分區(qū)(試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)),防止污染。
陽性對照需與樣本分裝操作。
本產(chǎn)品僅限科研用途,不可用于臨床診斷。
操作時需穿戴防護裝備,避免試劑接觸皮膚或眼睛。
樣本采集需遵循無菌原則,運輸時使用干冰或冰袋保存。
關(guān)鍵字: 假結(jié)核耶爾森菌;PCR檢測試劑盒;
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