?產(chǎn)品名稱:耶爾森菌通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Yersinia spp.PCR
貨號:YS-P014938
分類:PCR檢測試劑盒
規(guī)格?:50T/盒
檢測原理:
引物設(shè)計基于耶爾森菌屬高度保守的 16S rRNA 基因,可一次性篩查屬內(nèi)各類耶爾森菌。
反應(yīng)緩沖液適配不同菌種核酸理化特性,保障多種耶爾森菌模板均可順利擴增。
陽性屬參照菌株同步擴增,用于驗證試劑盒對耶爾森菌屬整體擴增能力。
實驗流程:
樣本處理(樣本處理區(qū))
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸,避免交叉污染。
試劑配制(試劑準備區(qū))
反應(yīng)體系(20μL/管):19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液,分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴增(核酸擴增區(qū))
循環(huán)參數(shù):
預(yù)變性:95℃ 2min(1循環(huán));
擴增:95℃ 15sec → 60℃ 30sec(45循環(huán),60℃時采集熒光信號,F(xiàn)AM通道)。
結(jié)果分析
陽性:Ct值≤40,擴增曲線呈指數(shù)增長;
陰性:無Ct值或曲線平直;
可疑:40<Ct≤45,需復(fù)測確認。
質(zhì)控要求:陽性質(zhì)控Ct≤32,陰性質(zhì)控?zé)o擴增。
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注意事項:
所有耗材必須無核酸酶,吸頭一次性使用,禁止重復(fù)吸?。?/span>
陽性模板拷貝濃度高,開蓋操作輕柔,避免氣溶膠擴散造成全域污染;
試劑融化后冰上放置不超過 2 h,用完立即放回 - 20℃;
廢棄 PCR 管、擴增產(chǎn)物、實驗廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄;
試劑盒僅用于動植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測,禁止人體臨床檢測;
移液器、操作臺定期紫外消毒,長期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
關(guān)鍵字: 耶爾森菌通用;PCR檢測試劑盒;
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